孕期十溴聯(lián)苯醚暴露對子代大鼠神經(jīng)行為發(fā)育的影響及其機制研究.pdf

1、[目的]
　　十溴聯(lián)苯醚（Decabromodiphenyl Ether，BDE-209）作為多溴聯(lián)苯醚（Polybrominated Diphenyl Ethers，PBDEs）的一種，是應(yīng)用最廣的溴化阻燃劑，在環(huán)境和人體中廣泛存在。已有研究結(jié)果提示，BDE-209對動物和人體都具有一定的神經(jīng)發(fā)育毒性，并且BDE-209可以通過胎盤屏障，影響胎兒的神經(jīng)發(fā)育，但 BDE-209孕期暴露對子代的神經(jīng)發(fā)育毒性及其機制尚不十分清楚。本實

2、驗通過建立孕期大鼠 BDE-209暴露模型，觀察孕期BDE-209暴露對子代大鼠空間學(xué)習(xí)記憶的影響，以BDNF的蛋白表達為切入點，從BDNF基因甲基化水平和甲狀腺激素水平兩個方面探索BDE-209對大鼠的神經(jīng)毒性機制。
　　[方法]
　　將孕鼠（SD大鼠）隨機分為BDE-209暴露組（100 mg/kg、300 mg/kg、900 mg/kg）和對照組，于妊娠6-20天進行灌胃染毒，每天一次，對照組用玉米油進行灌胃。采用曠場

3、實驗觀察子代大鼠活動力，應(yīng)用Morris水迷宮檢測大鼠空間學(xué)習(xí)和記憶能力。水迷宮實驗結(jié)束后，采用10％的水合氯醛麻醉子代大鼠（雄性），進行心臟采血，分離血清，置于-80 oC冰箱備用。然后對大鼠斷頭處死，在冰盤上快速分離海馬，置于液氮中速凍后置于-80 oC冰箱保存。采用放射免疫法檢測血清中的甲狀腺激素水平，采用Western Blot法檢測BDNF蛋白在海馬組織中的表達，以及甲基化特異性PCR法檢測BDNF基因的甲基化水平。
　

4、　[結(jié)果]
　　1）曠場實驗：各組子代大鼠在曠場中活動的總距離之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（雌性子代大鼠，F(xiàn)=2.13，P>0.05；雄性子代大鼠，F(xiàn)=0.70，P>0.05）
　　2）Morris水迷宮實驗：在隱蔽平臺實驗中，實驗第3天雌性子代大鼠對照組的潛伏期為37.64±14.1 s，300 mg/kg組和900 mg/kg組的潛伏期分別為57.9±22.1 s和71.9±24.8 s，300 mg/kg和900 mg/kg

5、組與對照組相比，潛伏期明顯延長（P<0.01），而雄性子代大鼠各組差異無統(tǒng)計學(xué)意義。在空間探索實驗中，雄性子代大鼠對照組、100 mg組、300 mg組和900 mg組在平臺象限的活動時間分別為36.73±11.38 s、25.70±3.03 s、22.23±4.27 s和30.60±3.89 s，各組間的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F=4.17，P=0.01），其中100 mg/kg和300 mg/kg組與對照組相比在平臺象限的活動時間明顯少于

6、對照組（P<0.01）；而雌性子代大鼠各組間無明顯差異。
　　3）BDNF蛋白表達：300 mg劑量組和900 mg劑量組海馬組織中BDNF蛋白表達相對對照組的濃度比（對照組濃度為1）分別為0.87和0.67，300 mg劑量組和900 mg劑量組BDNF蛋白表達水平明顯低于對照組（P<0.01）。
　　4）BDNF基因甲基化水平：隨著BDE-209染毒劑量增加BDNF基因中DNA甲基化百分比增加，但是各組之間的差異無統(tǒng)計學(xué)

7、意義（F=0.42，P>0.05）。
　　5）甲狀腺激素水平：BDE-209暴露的中高劑量組（900 mg，300 mg）的T4水平和FT4水平與對照組相比有明顯的下降（P<0.05），900 mg劑量組的T3水平與對照組相比也有明顯的下降（P<0.05），而100 mg劑量組與對照組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。
　　[結(jié)論]
　　1）孕期BDE-209暴露可能導(dǎo)致子代大鼠（雌性）空間學(xué)習(xí)能力下降和子代大鼠（