核心蛋白聚糖在小鼠肝纖維化形成及纖維化肝部分切除后余肝再生中作用的研究.pdf

1、本文從以下及部分進(jìn)行了闡述。
　　第一部分核心蛋白聚糖在小鼠肝纖維化形成中作用的實(shí)驗(yàn)研究。
　　目的:建立四氯化碳(CCl4)小鼠肝纖維化模型，注射CCl4后予小鼠尾靜脈注射小鼠外源性核心蛋白聚糖decorin(DCN)，觀察DCN對(duì)纖維化形成是否有緩解作用，同時(shí)分析肝組織中TGF-β1、SMA、TNF-α、HGF以及Caspase3等基因以及蛋白表達(dá)情況，探討DCN干預(yù)小鼠肝纖維化形成的機(jī)理。
　　方法:(1)20只

2、5周齡Balb/c小鼠，腹腔注射CCl45周建立肝纖維化模型，注射劑量為1ml/kg(CCl4體積∶橄欖油體積=1∶1)，每2天注射1次。檢測(cè)肝標(biāo)本中肝纖維化相關(guān)分子表達(dá)情況。(2)腹腔注射CCl4三周后，將存活小鼠隨機(jī)分為2組，實(shí)驗(yàn)組（DCN組）以及纖維化對(duì)照組。每天兩次予實(shí)驗(yàn)組注入250ug/kg核心蛋白聚糖DCN，對(duì)照組注射等量的PBS和NS混合液（體積比為1∶?。?。DCN注射2周后，取下兩組肝臟標(biāo)本。取下方葉并將其分成兩部分:一

3、部分切成多個(gè)小塊用于提取組織RNA，檢測(cè)相關(guān)基因表達(dá)情況;另外一部分放入福爾馬林中用于HE染色、Masson染色以及免疫組化檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)。
　　結(jié)果:外源性小鼠DCN蛋白可緩解四氯化碳誘導(dǎo)的肝纖維化。實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組肝纖維化程度明顯減輕，膠原纖維量明顯低于對(duì)照組。
　　結(jié)論:本部分實(shí)驗(yàn)以小鼠肝纖維化模型為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，自3周開(kāi)始向?qū)嶒?yàn)組注射DCN蛋白，結(jié)果表明外源性DCN可以抑制纖維化相關(guān)分子的表達(dá)，緩解肝纖維化形成。
　　

4、第二部分核心蛋白聚糖在纖維化肝部分切除后余肝再生中作用的研究。
　　目的:建立纖維化70％肝切除再生模型。尾靜脈注射外源性小鼠DCN蛋白，觀察DCN對(duì)纖維化肝部分切除后余肝再生是否有促進(jìn)作用。
　　方法:46只5周齡Balb/c小鼠，其中6只注射橄欖油，剩余40只注射CCl4建立5周肝纖維化模型。予存活肝纖維化小鼠實(shí)施70％肝切除術(shù)，術(shù)后將小鼠隨機(jī)分為3組:實(shí)驗(yàn)組（DCN組）、橄欖油對(duì)照組以及纖維化組。術(shù)后向?qū)嶒?yàn)組注射外源性