環(huán)境致癌劑苯并[a]芘對(duì)DNA損傷檢控反應(yīng)的影響.pdf

1、苯并[a]芘是由5個(gè)苯環(huán)組成的一種多環(huán)芳烴（PAH）化合物，是一切碳物質(zhì)熱分解的產(chǎn)物。由于性質(zhì)穩(wěn)定，來(lái)源廣泛，致癌性極強(qiáng)，BaP被世界衛(wèi)生組織國(guó)際癌癥研究中心指定為一級(jí)致癌物質(zhì)。 BaP在體內(nèi)的代謝途徑早已研究得很清楚。BaP在體內(nèi)P—450酶系的作用下可產(chǎn)生10余種代謝產(chǎn)物，其中反式BPDE（anti—BPDE）是BaP代謝的終致癌物，它帶有親電子基團(tuán)，可與細(xì)胞大分子DNA中的親核基團(tuán)鳥(niǎo)嘌呤的外環(huán)胺基端結(jié)合，還可與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合

2、，從而損傷DNA，進(jìn)而激活原癌基因或使抑癌基因失活，啟動(dòng)致突變/致癌過(guò)程。 細(xì)胞周期檢控點(diǎn)（cell cycle checkpoint）是現(xiàn)今國(guó)際上較為熱門(mén)的研究點(diǎn)之一，也是一個(gè)比較新的領(lǐng)域。細(xì)胞周期檢控點(diǎn)是細(xì)胞在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中逐漸形成的一套能夠檢測(cè)細(xì)胞周期運(yùn)行的維護(hù)細(xì)胞穩(wěn)定性和完整性的機(jī)制，主要包括DNA損傷檢控點(diǎn)（DNA damage checkpoint）、DNA復(fù)制檢控點(diǎn)（DNA replication checkpo

3、int）和紡錘體組裝檢控點(diǎn)（spindle assembly cbeckpoint）。DNA損傷檢控點(diǎn)能夠檢測(cè)受損或者結(jié)構(gòu)異常的DNA，并啟動(dòng)檢控點(diǎn)信號(hào)傳導(dǎo)途徑。DNA損傷檢控點(diǎn)信號(hào)傳導(dǎo)路徑的激活可引發(fā)一系列下游生物學(xué)事件，如細(xì)胞周期阻滯和對(duì)受損DNA的有效修復(fù)。 本論文利用MTT、流式細(xì)胞、單細(xì)胞凝膠電泳和Western Blot等技術(shù)，選用國(guó)內(nèi)建株的轉(zhuǎn)移性胃癌細(xì)胞株SGC—7901為對(duì)象，發(fā)現(xiàn)，作為環(huán)境致癌劑，BaP不僅能造

4、成DNA的雙鏈斷裂，誘導(dǎo)細(xì)胞周期的阻滯，高濃度的BaP還能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，而且，我們的研究發(fā)現(xiàn)，一定作用濃度和時(shí)間的BaP預(yù)處理能抑制放射模擬劑NCS激活的DNA損傷信號(hào)中部分激酶的磷酸化，例如，ATM下游信號(hào)傳導(dǎo)激酶Chk2在蘇氨酸68個(gè)殘基位點(diǎn)上的磷酸化程度能為BaP的預(yù)處理抑制，Brcal S1497位點(diǎn)的磷酸化程度也大大降低了，ATR下游信號(hào)傳遞激酶Chk1 S317的磷酸化程度也有所降低；組蛋白H2AX在serine139位點(diǎn)的

5、磷酸化也被抑制了，并且，Chk2、Brcal和Chk1、H2AX對(duì)BaP抑制作用的敏感性存在差別，就本研究看來(lái)，BaP抑制Chk2、Brcal磷酸化所需的濃度低于Chk1、H2AX，而前二者對(duì)BaP的敏感性范圍比后二者窄。 綜上所述，我們的實(shí)驗(yàn)表明了BaP作為一種傳統(tǒng)的環(huán)境致癌物質(zhì)，不僅能抑制細(xì)胞的生長(zhǎng)、誘導(dǎo)細(xì)胞周期的阻滯和造成DNA的斷裂，而且我們的研究發(fā)現(xiàn)，BaP能下調(diào)DNA損傷檢控信號(hào)途徑中Chk1（S317）、Chk2（