心肌細(xì)胞培養(yǎng)液對(duì)鼻咽癌細(xì)胞CNE-2增殖的影響及其機(jī)制的研究.pdf

1、本課題組前期研究體外已經(jīng)證實(shí)心肌細(xì)胞培養(yǎng)液能明顯抑制鼻咽癌細(xì)胞的生長(zhǎng),對(duì)非腫瘤細(xì)胞無(wú)抑制作用,推測(cè)心肌細(xì)胞培養(yǎng)液中可能含有一種或幾種安全有效的抑瘤活性物質(zhì),該抑瘤活性無(wú)濃度依賴性。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)心肌細(xì)胞培養(yǎng)液能抑制S180小鼠移植瘤生長(zhǎng),不影響小鼠的正常生長(zhǎng);在CNE2裸鼠移植瘤模型得到了相同的答案,證實(shí)了該抑瘤活性物質(zhì)的安全性和有效性,并進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)其抑瘤機(jī)制與誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡有關(guān),同腫瘤微血管的生成無(wú)關(guān);經(jīng)葡聚糖凝膠層析分離提純

2、及質(zhì)譜鑒定推測(cè)心肌細(xì)胞培養(yǎng)液中抑瘤活性成分中可能含有EIF-5A或該蛋白的裂解片段。
　　目的:通過(guò)體外抑瘤實(shí)驗(yàn)探討心肌細(xì)胞培養(yǎng)液(myocardial cells culture medium,CMCM)對(duì)人鼻咽癌低分化鱗癌細(xì)胞系生長(zhǎng)的影響,并對(duì)其抑瘤機(jī)制進(jìn)行探討。
　　方法:分別于CMCM作用于CNE-2細(xì)胞12小時(shí)、24小時(shí)、36小時(shí)、48小時(shí)、60小時(shí)、72小時(shí)采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞的存活情況,同時(shí)以順鉑(DDP1.2

3、6μg/ml)作為陽(yáng)性對(duì)照,RPMI1640培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照,計(jì)算出細(xì)胞存活率,繪制生長(zhǎng)曲線;并在作用24小時(shí)時(shí)采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組CNE-2細(xì)胞的周期分布及凋亡情況。
　　結(jié)果:作用12小時(shí)后CMCM組與DDP組細(xì)胞存活率( x±s,％)分別為87.27±6.99、89.88±0.72,與陰性對(duì)照組100.00±4.06相比便存在顯著差異(P<0.05)。隨著時(shí)間的延長(zhǎng),差異逐漸增大,72小時(shí)后差異達(dá)最大, CMCM組與DD

4、P組細(xì)胞存活率( x±s,％)分別為21.45±2.45、12.72±1.52,與陰性對(duì)照組100.00±10.69相比,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各實(shí)驗(yàn)組分別作用于鼻咽癌細(xì)胞24小時(shí)后,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布及凋亡情況。CMCM組 G0/G1期細(xì)胞比率( x±s,％)為68.70±3.40,與陰性對(duì)照組50.16±2.92相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,DDP組G0/G1期細(xì)胞比率為47.97±1.87,與陰性對(duì)照組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

5、DDP組G2/M期細(xì)胞比率( x±s,％)為22.10±2.67,明顯高于陰性對(duì)照組6.60±2.03(P<0.05), CMCM組G2/M期細(xì)胞比率為8.10±1.78,與陰性對(duì)照組相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。細(xì)胞凋亡率( x±s,％)CMCM組與DDP組分別為39.80±2.08、5.86±1.66,與陰性對(duì)照組0.11±0.05相比,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:心肌細(xì)胞培養(yǎng)液對(duì)鼻咽癌細(xì)胞CNE-2生長(zhǎng)的抑制作用具有時(shí)間依賴