microRNA-143對(duì)人鼻咽癌細(xì)胞CNE-2Z增殖、遷移和侵襲的影響.pdf

1、目的：
　　本研究通過(guò)比較鼻咽上皮細(xì)胞和不同分化程度鼻咽癌細(xì)胞中miR-143的表達(dá)水平，選擇miR-143低表達(dá)的細(xì)胞株，利用慢病毒載體使其過(guò)表達(dá)miR-143，探討miR-143對(duì)鼻咽癌細(xì)胞CNE-2Z增殖、遷移和侵襲的影響。
　　方法：
　　利用熒光定量PCR檢測(cè)人永生化鼻咽上皮細(xì)胞（NP69）、高分化鼻咽癌細(xì)胞（CNE-1）、低分化鼻咽癌細(xì)胞（CNE-2Z）中miR-143的表達(dá)水平，篩選出mi R-143表達(dá)

2、水平低的細(xì)胞株。根據(jù)miR-143的序列設(shè)計(jì)shRNA構(gòu)建慢病毒表達(dá)載體，并包裝慢病毒，利用感染慢病毒的方式建立穩(wěn)定過(guò)表達(dá)miR-143的CNE-2Z細(xì)胞，并用熒光定量PCR進(jìn)行檢測(cè)其中miR-143的表達(dá)水平。通過(guò)CCK-8法檢測(cè)過(guò)表達(dá)miR-143對(duì)CNE-2Z細(xì)胞增殖的影響，通過(guò)Transwell遷移和侵襲試驗(yàn)分析過(guò)表達(dá)miR-143對(duì)CNE-2Z細(xì)胞遷移和侵襲的影響。
　　結(jié)果：
　　低分化鼻咽癌細(xì)胞（CNE-2Z）

3、中miRNA-143的表達(dá)水平顯著低于CNE-1和NP69細(xì)胞（P<0.01）。成功包裝表達(dá)miR-143的慢病毒，并感染CNE-2Z細(xì)胞，穩(wěn)定過(guò)表達(dá)miRNA-143的CNE-2Z細(xì)胞（CNE-2Z/miR-143）中miRNA-143的表達(dá)水平顯著高于CNE-2Z細(xì)胞（P<0.01）和慢病毒對(duì)照組細(xì)胞（CNE-2Z/miR-NC）（P<0.01）。細(xì)胞增殖能力檢測(cè)顯示與CNE-2Z組（P<0.05）和CNE-2Z/miR-NC組（P

4、<0.01）相比CNE-2Z/miR-143組在72 h和96 h時(shí)細(xì)胞活力顯著降低。Tran swell遷移和侵襲試驗(yàn)結(jié)果顯示CNE-2Z/miR-143組與CNE-2Z組和CNE-2Z/miR-NC組相比細(xì)胞遷移和侵襲能力顯著下降（P<0.01）。
　　結(jié)論：
　　在鼻咽癌細(xì)胞中miR-143的表達(dá)水平顯著低于正常鼻咽上皮細(xì)胞，且在低分化鼻咽癌細(xì)胞中 miR-143表達(dá)水平比高分化鼻咽癌細(xì)胞低；慢病毒載體是一種高效的在靶