異基因造血干細(xì)胞移植后嵌合狀態(tài)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)的臨床應(yīng)用.pdf

1、目的:
　　探討供、受細(xì)胞嵌合的形成與造血恢復(fù)、急性移植物抗宿主病(Acute graft versus hostdisease，aGVHD)、移植物被排斥/復(fù)發(fā)的關(guān)系，并將動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)嵌合演變類型進(jìn)行分類，分析不同嵌合類型與準(zhǔn)確預(yù)判移植物穩(wěn)定植入、移植物被排斥及疾病復(fù)發(fā)的關(guān)系。
　　方法:
　　回顧性分析某三甲醫(yī)院血液科2008年3月至2013年5月動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)嵌合狀態(tài)的76例異基因造血干細(xì)胞移植(Allogeneic he

2、matopoietic stem cell transplantation，allo-HSCT)病例的臨床資料和嵌合結(jié)果，供受者性別不合的移植病例采用FISH技術(shù)分析X/Y染色體監(jiān)測(cè)嵌合，供、受者性別相合的移植病例采用PCR法分析15個(gè)短串聯(lián)重復(fù)序列(Shorttandem repeat，STR)位點(diǎn)和1個(gè)性別位點(diǎn)，根據(jù)基因位點(diǎn)差異，代入相應(yīng)公式計(jì)算嵌合率(Donor chimerism，DC)。以移植后+1個(gè)月所測(cè)嵌合為首次嵌合，分析

3、完全供者型嵌合(Full donor chimerism，F(xiàn)DC)和混合嵌合(Mixed chimerism，MC)與aGVHD發(fā)生率的關(guān)系，將不同時(shí)間點(diǎn)的嵌合演變類型分為穩(wěn)定型完全供者型嵌合(Stable full donor chimerism,SFDC)，減少型混合嵌合(Decreased type of mixed chimerism，DMC)、增高型混合嵌合(Increased type mixed chimerism，IMC

4、)和未形成完全供者型嵌合(Never full donorchimerism，NFDC)，并分析不同嵌合類型與預(yù)后的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　1.清髓性移植(Myeloablative stem cell transplantation，MST)組56例和非清髓移植(Nonmyeloablative stem cell transplantation，NST)組20例，MST組中性粒細(xì)胞(Absoluteneutrophil

5、count，ANC)＞0.5×109/L的平均時(shí)間是16.4士4.7天(9～41天)，NST組ANC＞0.5×109/L的平均時(shí)間是13.2土2.2(9～18天)。NST組ANC恢復(fù)時(shí)間早于MST,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(秩和檢驗(yàn)Z=-3.5323，P=0.0004)。10例植入證據(jù)不足或ANC減低行移植早期嵌合監(jiān)測(cè)，7例+14天即形成FDC，2例形成高比例MC后進(jìn)行性下降，其中1例+28天完全被排斥。
　　2.移植后+1個(gè)月有70/76例

6、(92.2％)形成FDC，MST組和NST組+1個(gè)月達(dá)到FDC和平均DC值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05); MST組44/56例(78.6％)形成SFDC，NST組有13/20例(65.0％)形成SFDC，兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=1.448,P=0.229)。
　　3.移植后+1個(gè)月嵌合分組，F(xiàn)DC組有42例(60.0％)發(fā)生aGVHD，MC組有2例(33.3％)發(fā)生aGVHD，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05）。
　　4.

7、SFDC組58/76例(76.3％)，復(fù)發(fā)率(Recurrence rate，RR):1/58例(1.7％)，總生存率(Overall survival，OS):45/58例(77.6％)，中位生存時(shí)間:20.5個(gè)月(1～120個(gè)月)，復(fù)發(fā)性死亡(Relapse mortality, RM):1/58例(1.7％);DMC組6/76例(7.9％)，RR:4/6例(66.7％)，OS:5/6例(83.3％)，中位生存時(shí)間:57個(gè)月（6～1

8、17個(gè)月），RM:0/6例(0％);IMC組7/76(9.2％)，RR:6/7例(85.7％)，OS:1/7例(14.3％)，中位生存時(shí)間:11個(gè)月(2～31個(gè)月)，RM:5/7例(71.4％);NFDC組5/76例(6.6％)，RR:4/5例(80.0％)，OS:1/5(20.0％)，中位生存時(shí)間:3.5個(gè)月(1.1～14個(gè)月)，RM:3/5例(60.0％)。
　　SFDC、DMC、IMC和NFDC四組不同嵌合動(dòng)態(tài)變化類型病例的

9、復(fù)發(fā)率經(jīng)Fisher精確概率法計(jì)算差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=7.027E-14)，經(jīng)Cochran-Armitage趨勢(shì)檢驗(yàn)，這四種類型移植物排斥/復(fù)發(fā)率有升高的趨勢(shì)(P＜0.0001)，NFDC組和IMC組的中位生存時(shí)間顯著少于DMC組和SFDC組（P＜0.05），且復(fù)發(fā)性死亡率顯著高于DMC組和SFDC組(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.供、受細(xì)胞的嵌合狀態(tài)可以準(zhǔn)確判斷異基因移植供者干細(xì)胞是否成功植入。
　　2.

10、92.2％的移植病例在移植后+1個(gè)月形成FDC，NST與傳統(tǒng)的MST同樣可獲得較高的SFDC率，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，達(dá)到長(zhǎng)期治愈效果。
　　3.移植后+1個(gè)月FDC組和MC組的aGVHD發(fā)生率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，移植后+7天起早期嵌合監(jiān)測(cè)結(jié)果可能對(duì)早期預(yù)判aGVHD的高危患者，指導(dǎo)臨床調(diào)整免疫抑制劑方案或延長(zhǎng)使用的時(shí)間更有意義。
　　4.SFDC、DMC、IMC和NFDC四組嵌合演變類型的移植物排斥/復(fù)發(fā)率有升高的趨勢(shì)，NFDC