白囊耙齒菌液體深層發(fā)酵條件優(yōu)化及多糖研究.pdf

1、白囊耙齒菌[Irpex lacteus(Fr.) Fr.]是一種藥用真菌，在傳統(tǒng)醫(yī)學中用于治療慢性腎小球炎癥，其液體發(fā)酵菌絲體多糖已被開發(fā)生產(chǎn)“益腎康”藥物。隨著白耙齒菌產(chǎn)品臨床應用的增加，其在治療腎炎、前列腺炎方面的藥用價值越來越得到認可。在擴大生產(chǎn)規(guī)模的過程中，白耙齒菌液體發(fā)酵和多糖提取存在生產(chǎn)效率低及產(chǎn)品作用機制不明等問題，因此迫切需要加強白耙齒菌液體深層發(fā)酵和多糖提取條件優(yōu)化的系統(tǒng)研究，提高生產(chǎn)效率，同時研究其多糖的結構和作用機

2、制，為白耙齒菌產(chǎn)品的應用及產(chǎn)品的國際化提供理論依據(jù)。
　　本試驗主要通過野外采集標本，分離菌株，通過形態(tài)學和分子生物學進行鑒定，以確認所用菌株的正確性。對白囊耙齒菌菌絲體生長的營養(yǎng)需求和培養(yǎng)條件進行單因素試驗，得到最佳培養(yǎng)溫度為30至35°C，菌絲生長對pH不敏感，在供試pH為3-9條件下生長均較好，黑暗培養(yǎng)有利于生物量積累，最佳接種量為10-15%。對菌絲生長的營養(yǎng)需求進行研究，包括9種碳源，9種氮源，11種維生素，10種金屬元

3、素，得到最優(yōu)碳、氮源、金屬離子和維生素分別為可溶性淀粉，大豆蛋白胨，Ca2+和酵母提取物。正交試驗優(yōu)化得到最佳半合成培養(yǎng)基為：可溶性淀粉60 g l-1，大豆蛋白胨25 g l-1，CaCl20.6 g l-1，酵母提取物15 g l-1。生長曲線研究得到最佳發(fā)酵終止時間為6 d，發(fā)酵終止可獲得的最大生物量為19.34 g l-1。復合培養(yǎng)基試驗結果表明添加麥麩、土豆都有利于白囊耙齒菌的生物量累積。
　　測定了白囊耙齒菌菌絲腺苷和

4、甘露醇的含量，腺苷含量為3.67 mg g-1，甘露醇含量為2.56%。成功用木屑栽培出白囊耙齒菌的子實體。
　　對白囊耙齒菌的菌絲體多糖通過透析純化，使用DEAE-52離子交換層析，經(jīng)Sephadex-G100凝膠層析純化，最后分離得到3組組分ILPS1，ILPS2，ILPS3。高效陰離子交換色譜對ILPS1、胞外粗多糖、胞內(nèi)粗多糖的單糖組分進行了分析，三者單糖組成不完全相同。ILPS1以甘露糖為主，含有少量葡萄糖胺、半乳糖和葡