脂肪干細胞移植促進擴張皮膚再生的實驗研究.pdf

1、實驗背景：
　　組織擴張術(shù)是整形外科手術(shù)中的一項基本技術(shù)。由于皮膚有限的再生能力，使得臨床上一般需要4-6個月的擴張周期。如何增加皮膚的再生能力，在較短時間內(nèi)獲得大面積的新生皮膚，仍是整形外科醫(yī)生面臨的難題。組織擴張產(chǎn)生一個類似于組織創(chuàng)傷修復(fù)的內(nèi)環(huán)境。而ADSCs移植治療已被證明可以有效地促進創(chuàng)傷修復(fù)。
　　實驗?zāi)康模?br>　　觀察ADSCs移植是否可以促進擴張皮膚再生，并探討其機制。
　　實驗方法：
　　(1

2、)觀察培養(yǎng)ADSCs的上清液對成纖維細胞遷移、增殖及I型膠原基因表達的影響；
　　(2)建立大鼠組織擴張模型，根據(jù)移植細胞的不同，將大鼠分為 ADSCs組、成纖維細胞組、對照組。每周注水2次，保持擴張器囊內(nèi)壓為60mmHg。擴張4w后統(tǒng)計三組擴張量、擴張面積及回縮率；
　　(3)分別收取1w、2w、4w時的擴張皮膚，觀察各組皮膚厚度及皮膚中增殖細胞的數(shù)量、膠原含量、血管密度、巨噬細胞及肌成纖維細胞密度；
　　(4)體外

3、誘導(dǎo)ADSCs向內(nèi)皮細胞和表皮細胞分化，并將BrdU標記的ADSCs回植入體內(nèi)4w，觀察移植細胞的成活情況及分布；
　　(5)觀察ADSCs和成纖維細胞中及各組擴張皮膚中VEGF、EGF及bFGF基因及蛋白的表達。
　　實驗結(jié)果：
　　(1)培養(yǎng)ADSCs的上清液可以促進成纖維細胞的遷移、增殖和I型膠原基因表達，其效果呈現(xiàn)劑量依賴性；
　　(2)ADSCs移植后組織擴張量和擴張面積均增加，而回縮率減??；擴張結(jié)束后

4、ADSCs組各層皮膚厚度均高于其余兩組，而纖維囊的厚度未出現(xiàn)統(tǒng)計學(xué)差異；
　　(3)ADSCs組擴張皮膚中增殖細胞數(shù)量增多，主要出現(xiàn)于表皮基底層和毛囊中；ADSCs組擴張皮膚中含有更多的羥脯氨酸，膠原排列也更致密；擴張結(jié)束后ADSCs組的毛細血管密度高于其余兩組；7d時ADSCs組皮膚中的巨噬細胞密度和14d時的肌成纖維細胞密度和其余兩組無統(tǒng)計學(xué)差異；
　　(4)體外誘導(dǎo)7d后，ADSCs可以分化為內(nèi)皮細胞和表皮細胞；Brd