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文檔簡介
1、背景:腦缺血是嚴(yán)重威脅人類健康的高發(fā)疾病,其中血腦屏障是腦缺血-再灌注損傷重要的病理生理基礎(chǔ)。因此,研究腦缺血-再灌注損傷時血腦屏障的變化,以及可能的保護(hù)機(jī)制對腦缺血-再灌注損傷的治療具有重要的意義。電針作為祖國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中的一種重要的治療手段,對于缺血缺氧性腦病以及缺血-再灌注損傷具有確切的治療效果,有關(guān)其作用機(jī)制方面的研究一直是研究熱點(diǎn)之一。
目的:通過復(fù)制腦缺血再灌注模型,探討電針預(yù)處理百會穴對于腦缺血-再灌注損傷大鼠血腦
2、屏障通透性以及Caveolin-1的影響。
方法:取SD大鼠140只,采用線栓法制備大鼠大腦中動脈閉塞模型。大鼠隨機(jī)分為四組:假手術(shù)組(S組),模型3h組(I/R3h組),模型24h組(I/R24h組),電針預(yù)處理3h組(EA+ I/R3h組),電針預(yù)處理24h組(EA+I/R24h組)。首先,觀察電針預(yù)處理的腦保護(hù)作用,采用Longa評分對大鼠神經(jīng)行為學(xué)評分,采用Tunel法測細(xì)胞凋亡的情況,同時采用TTC染色觀察腦梗死容積
3、;其次,觀察電針預(yù)處理對血腦屏障通透性的影響,采用干濕重法評估腦組織含水量,采用透射電鏡觀察血腦屏障的超微結(jié)構(gòu);最后應(yīng)用western blot觀察電針預(yù)處理百會穴對緊密連接蛋白Claudin-5、Occludin,以及Caveolin-1、p-Caveolin-1、Akt、p-Akt、eNOS表達(dá)的影響。
結(jié)果:(1)大鼠神經(jīng)功能評分,I/R3h組、I/R24h組分別為(2.30±0.22,2.45±0.22),兩組之間沒有
4、顯著差異,但均明顯高于S組(0.00±0.00)。EA+I/R3h組、EA+I/R24h組大鼠神經(jīng)功能評分分別為(2.00±0.13,2.10±0.16),兩組之間沒有顯著差異,但均明顯高于S組。EA+I/R3h組較I/R3h組,EA+I/R24h組較I/R24h組大鼠神經(jīng)功能評分有一定改善。
(2)TTC染色評估腦梗死的容積,與S組(0.00±0.00)比較,I/R3h組(42.87±4.70)、I/R24h組(43.75±
5、6.20)腦梗死容積顯著增加(P<0.05)。電針預(yù)處理后能夠顯著地減少腦梗死的容積,EA+I/R3h組(24.40±4.54)較I/R3h組,EA+I/R24h組(25.63±2.76)較I/R24h組腦梗死容積顯著減少(P<0.05)。
(3)大鼠腦組織Tunel染色,與S組(77.68±0.85)相比,I/R3h組(82.49±1.90)、I/R24h組(85.45±1.73)、EA+I/R3h組(80.24±0.53)
6、、EA+I/R24h組(83.00±0.20)大鼠腦組織凋亡細(xì)胞數(shù)均顯著增加。I/R24h組較I/R3h組大鼠腦組織凋亡細(xì)胞數(shù)顯著增加,EA+I/R3h組較I/R3h組大鼠腦組織凋亡細(xì)胞數(shù)顯著減少。EA+I/R24h組較I/R24h組大鼠腦組織凋亡細(xì)胞數(shù)顯著減少。
(4)大鼠腦組織含水量,與S組(77.68±0.85)相比,I/R3h組(82.49±1.90)、I/R24h組(85.45±1.73)、EA+I/R3h組(80.
7、24±0.53)、EA+I/R24h組(83.00±0.20)大鼠腦組織含水量均顯著增加。I/R24h組較I/R3h組大鼠腦組織含水量顯著增加,EA+I/R3h組較I/R3h組大鼠腦組織含水量顯著減少。EA+I/R24h組較I/R24h組大鼠腦組織含水量顯著減少。
(5)Claudin-5表達(dá)情況,與S組(0.49±0.03)相比,I/R3h組(0.11±0.13)、I/R24h組(0.08±0.10)、EA+I/R3h組(0
8、.38±0.05)、EA+I/R24h組(0.28±0.13)Claudin-5均顯著降低。EA+I/R3h組較I/R3h組,EA+I/R24h組較I/R24h組Claudin-5顯著降低。
(6)Occludin表達(dá)情況,與S組(0.55±0.03)相比,I/R3h組(0.27±0.05)、I/R24h組(0.06±0.02)、EA+I/R3h組(0.46±0.03)、EA+I/R24h組(0.44±0.06)Occludi
9、n均顯著降低。I/R24h組較I/R3h組,EA+I/R3h組較I/R3h組,EA+I/R24h組較I/R24h組Occludin顯著降低。
結(jié)論:1、電針預(yù)處理對于腦缺血-再灌注損傷具有保護(hù)作用。2、電針預(yù)處理顯著降低腦缺血-再灌注損傷時增高的血腦屏障的通透性。3、電針預(yù)處理顯著增加腦缺血-再灌注損傷時減少的Claudin-5、Occludin的表達(dá)。4、電針預(yù)處理顯著降低腦缺血-再灌注損傷時增加的腦微血管區(qū)內(nèi)皮細(xì)胞p-ca
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