半夏水提取液誘導(dǎo)人白血病K562細(xì)胞凋亡的初步研究.pdf

1、目的:從惡性腫瘤從痰論治的理論出發(fā)，通過觀察生、法半夏水提取液對K562細(xì)胞增殖、凋亡及周期的影響，初步探討半夏抗白血病的作用機(jī)制，比較生半夏、法半夏在體外對K562細(xì)胞的作用差異，為用半夏治療白血病的臨床應(yīng)用提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和參考。
　　方法:
　　1.理論研究
　　采用文獻(xiàn)分析法，歸納中醫(yī)對慢性粒細(xì)胞白血病的認(rèn)識，探討腫瘤與痰證的關(guān)系，根據(jù)前人對腫瘤從痰論治的理論，討論從痰論治慢性粒細(xì)胞白血病的理論依據(jù)和研究價值

2、。
　　2.實(shí)驗(yàn)研究
　　無菌條件下配備不同濃度的生、法半夏水提取液，使其終濃度分別為1000ug/ml、350ug/ml、70ug/ml。用CCK-8法檢測在不同濃度的生、法半夏水提取液作用24h、48h、72h后，K562細(xì)胞的增殖情況，并計算其生長抑制率；流式細(xì)胞儀檢測不同濃度的生、法半夏水提取液作用24h、48h后，K562細(xì)胞的凋亡率及周期分布的情況。所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析。
　　結(jié)

3、果:
　　1）生、法半夏水提取液對人慢性粒細(xì)胞白血病K562細(xì)胞的增殖均具有明顯的抑制作用，而且具有一定的劑量和時間依賴性，抑制作用隨著藥物濃度增加和作用時間延長而增強(qiáng)。
　　2）生、法半夏水提取液均能誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡，并能將K562細(xì)胞阻滯于G0/G1期。
　　3）在藥物濃度較小，作用時間較短時，法半夏水提取液的增殖抑制、誘導(dǎo)凋亡和周期阻滯作用與生半夏水提取液相當(dāng)，在藥物濃度達(dá)350ug/ml及以上、作用時間達(dá)4

4、8h及以上時，生半夏水提取液的增殖抑制、誘導(dǎo)凋亡及周期阻滯作用均強(qiáng)于法半夏，但同時在生半夏水提取液作用下K562細(xì)胞壞死情況也比法半夏嚴(yán)重。
　　結(jié)論:
　　1）生、法半夏水提取液可能是通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并延長K562細(xì)胞GO/G1期，干擾DNA的合成，使得進(jìn)入DNA合成期即S期的細(xì)胞減少，導(dǎo)致細(xì)胞增殖周期延長，從而K562細(xì)胞增殖受抑，半夏水提取液的抗腫瘤作用可能與上述因素有關(guān)。
　　2）在一定濃度和時間范圍內(nèi)，生半