法舒地爾對(duì)脂多糖誘導(dǎo)大鼠急性肺損傷的影響.pdf

1、目的：急性肺損傷的致病因素有很多，肺血管內(nèi)皮細(xì)胞破壞，血管通透性增高是急性肺損傷的特征之一。本實(shí)驗(yàn)擬探討RhoA/Rho激酶途徑和相關(guān)骨架蛋白參與肺血管內(nèi)皮細(xì)胞屏障破壞的分子機(jī)制，及法舒地爾對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的急性肺損傷的保護(hù)作用。
　　方法：18只健康Wistar大鼠隨機(jī)分三組：對(duì)照組（Control組）、脂多糖組（LPS組）及法舒地爾組（Fasudil組），每組各6只。LPS組采用―二次打擊‖方式建立模型，腹腔注射(IP)LPS1

2、mg/kg，16 h后氣管滴注(IT)LPS3 mg/kg；Fasudil組在IP前30 min和IT1 h后給予fasudil10 mg/kg干預(yù)處理；Control組則在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)給予等容生理鹽水。于造模后3h各時(shí)間點(diǎn)處死大鼠取肺。①HE染色觀察肺組織形態(tài)學(xué)改變。②肺組織濕/干重比（W/D），MDA含量、MPO活性檢測(cè)肺損傷程度。③Real-Time PCR及Western-Blot法分別檢測(cè)RhoA、ROCK2及p-ERM在肺組織

3、中的表達(dá)。
　　結(jié)果：⑴病理形態(tài)學(xué)檢查提示，LPS組炎性細(xì)胞滲出嚴(yán)重，肺泡破裂，間質(zhì)水腫，經(jīng) fasudil干預(yù)后，炎性細(xì)胞滲出有所減少，肺泡結(jié)構(gòu)破壞減輕。⑵肺組織W/D，MDA含量和MPO活性檢測(cè)結(jié)果提示，與Control組相比，LPS組中W/D、MDA含量和MPO活性均顯著增加（P<0.01），而Fasudil組卻有所下降（P<0.05），其中以MDA和MPO顯著降低（P<0.01）。⑶mRNA水平表達(dá)提示，RhoA mRNA

4、和ROCK2 mRNA在LPS組表達(dá)顯著增高（P<0.01），而在Fasudil組ROCK2 mRNA表達(dá)卻有降低（P<0.05），而RhoA卻沒(méi)有改變（P>0.05）；蛋白水平表達(dá)提示，ROCK2和p-ERM在LPS組中高表達(dá)（P<0.01），在Fasudil組中低表達(dá)（P<0.05)，RhoA卻沒(méi)有明顯差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：①脂多糖可誘導(dǎo)大鼠典型的急性肺損傷，可能通過(guò) RhoA/ROCK信號(hào)通路引起細(xì)胞骨架的改變，