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1、目的:研究用賴氨酰氧化酶(Lysyl Oxidase,LOX)的抑制劑b-氨基丙腈(b-Aminopropionitrile,BAPN)和抗賴氨酰氧化酶特異性抗體anti-LOX抑制賴氨酰氧化酶后,對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901體外黏附、遷徙的影響,對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)血管形成的影響,以評(píng)價(jià)賴氨酰氧化酶對(duì)腫瘤細(xì)胞黏附、遷徙能力和誘導(dǎo)血管生成能力的作用。<
2、br> 方法:培養(yǎng)胃癌細(xì)胞SGC-7901,分別用0.1mM、0.2mM、0.3mM BAPN和5.0μg/ml、10.0μg/ml、15.0μg/ml anti-LOX抑制LOX后,通過同質(zhì)黏附實(shí)驗(yàn)和異質(zhì)黏附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SGC-7901同質(zhì)黏附和異質(zhì)黏附能力的改變,以體外劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)SGC-7901遷徙能力的改變。培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,用體外纖維凝膠血管生成檢測(cè)試劑盒檢測(cè)用0.1mM、0.2mM、0.4mM BAPN抑制LOX后,對(duì)
3、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和佛波醇-12-肉豆蔻酯-13-乙酯(Phorhol-12-myristate-13-acetate,PMA)誘導(dǎo)的HUVEC的血管生成能力的影響。
結(jié)果:
1、同質(zhì)黏附實(shí)驗(yàn)顯示,0.1mM、0.2mM、0.3mM
4、BAPN 抑制LOX后,可增強(qiáng)胃癌細(xì)胞SGC-7901的同質(zhì)黏附能力,差異具有顯著性(P﹤0.05);5.0μg/ml、10.0μg/ml、15.0μg/ml anti-LOX抑制LOX后,也增強(qiáng)胃癌細(xì)胞SGC-7901的同質(zhì)黏附能力,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P﹤0.05)。
2、異質(zhì)黏附實(shí)驗(yàn)表明,0.1mM、0.2mM、0.3mM BAPN抑制LOX后,可減弱胃癌細(xì)胞SGC-7901的異質(zhì)黏附能力(P﹤0.05);5.0μg
5、/ml、10.0μg/ml、15.0μg/ml anti-LOX抑制LOX后,下調(diào)胃癌細(xì)胞SGC-7901的異質(zhì)黏附能力,差異顯著(P﹤0.05)。
3、體外劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果為,0.1mM、0.2mM、0.3mM BAPN抑制LOX后,使胃癌細(xì)胞SGC-7901的體外遷徙能力下降,差異有顯著性(P﹤0.05);5.0μg/ml、10.0μg/ml、15.0μg/ml anti-LOX抑制LOX后,同樣可使胃癌細(xì)胞SGC-790
6、1的體外遷徙能力降低(P﹤0.05)。
4、體外纖維凝膠血管生成檢測(cè)出,0.1mM、0.2mM、0.4mM BAPN抑制LOX后,可抑制由血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子和佛波醇-12-肉豆蔻酯-13-乙酯誘導(dǎo)的血管形成,與對(duì)照組相比,分枝點(diǎn)的數(shù)目顯著減少(P﹤0.05)。
結(jié)論:BAPN和anti-LOX抑制LOX后,均可增強(qiáng)胃癌細(xì)胞SGC-7901的同質(zhì)黏附、減弱其異質(zhì)黏附、抑制其體外遷徙能力,提
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