六價(jià)鉻致癌機(jī)制及綠茶拮抗作用的研究.pdf

1、目的：Cr(Ⅵ)在工業(yè)上應(yīng)用極廣，已被國(guó)際癌癥研究所(IARC)證實(shí)是一種強(qiáng)致癌劑，可導(dǎo)致職業(yè)性肺癌，但其致癌機(jī)制還不是很明確。近10余年來(lái)，分子生物學(xué)飛速發(fā)展，腫瘤發(fā)生機(jī)制的認(rèn)識(shí)亦隨之不斷深入。研究顯示：癌基因的激活和抑癌基因的失活都是腫瘤發(fā)生的分子基礎(chǔ)，目前已在多種人類腫瘤中發(fā)現(xiàn)此現(xiàn)象。但有關(guān)Cr(Ⅵ)對(duì)細(xì)胞內(nèi)癌基因和抑癌基因水平的影響，國(guó)內(nèi)至今報(bào)道很少。為了探討Cr(Ⅵ)化合物的致癌機(jī)制及綠茶對(duì)其的拮抗效應(yīng)，以人胚肺成纖維細(xì)胞(H

2、EL)為體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，研究了重鉻酸鉀在體外誘導(dǎo)正常人胚肺細(xì)胞內(nèi)癌基因及抑癌基因表達(dá)的影響，進(jìn)一步揭示Cr(Ⅵ)的致癌機(jī)制，同時(shí)研究了綠茶對(duì)Cr(Ⅵ)的拮抗作用及其作用機(jī)制。 方法：HEL細(xì)胞為受試對(duì)象，通過(guò)MTT試驗(yàn)檢驗(yàn)Cr(Ⅵ)、綠茶對(duì)HEL細(xì)胞存活率的影響。Cr(Ⅵ)濃度為0、0.625、1.25、2.50、5.0、10.0、20.0μmol/L；綠茶終濃度為1mg/ml，處理時(shí)間為24h。普通光學(xué)顯微鏡觀察HEL細(xì)胞一

3、般形態(tài)；吖啶橙染色法觀察HEL細(xì)胞胞核的形態(tài)學(xué)改變。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)測(cè)定5.0μ.mol/LCr(Ⅵ)、10.0μmol/LCr(Ⅵ)、5.0μmol/LCr(Ⅵ)+綠茶、10.0μmol/LCr(Ⅵ)+綠茶各組HEL細(xì)胞內(nèi)p53、bcl-2轉(zhuǎn)錄水平。免疫組化法檢測(cè)P53、Bcl-2蛋白水平及蛋白定位。 結(jié)論：Cr(Ⅵ)可抑制HEL細(xì)胞增殖，引起細(xì)胞形態(tài)改變；Cr(Ⅵ)可增加p53、bcl-2轉(zhuǎn)錄活性及誘導(dǎo)P