EGF、EGFR與ERBB4在鼻息肉上皮中的表達(dá).pdf

1、研究背景及目的：
　　鼻息肉的主要病理特征為鼻黏膜水腫，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，上皮修復(fù)異常與重塑。正常鼻腔粘膜上皮有一定的自我修復(fù)功能，而鼻息肉的上皮修復(fù)功能存在缺陷，常伴有上皮的重塑。表皮生長(zhǎng)因子(epidermal growth factor, EGF)是一種刺激細(xì)胞生長(zhǎng)，增殖和分化的生長(zhǎng)因子，是表皮生長(zhǎng)因子家族成員之一。表皮生長(zhǎng)因子受體家族，又稱ERBB家族，包含四種蛋白，分別是:表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR、ERBB-1)、Her2

2、(ERBB-2)、Her3(ERBB-3)以及Her4(ERBB-4)。本文選擇其中的EGFR和ERBB4進(jìn)行研究，表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermal growth factorreceptor，EGFR，ERBB1)是表皮生長(zhǎng)因子家族的細(xì)胞外蛋白配體的細(xì)胞表面受體。ERBB4是ERBB家族另一個(gè)重要成員，其在鼻息肉上皮中的作用尚不清楚。EGF、EGFR在上皮組織的正常修復(fù)中起了重要作用，但是否參與鼻腔粘膜上皮組織的損傷修復(fù)以及在鼻息

3、肉發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起到什么作用仍有待研究，本文選用了EGF、EGFR、ERBB4因子進(jìn)行研究，旨在探討它們?cè)谡１乔徽衬ど掀ず捅窍⑷饨M織中的表達(dá)、與鼻息肉病理變化的相關(guān)意義及對(duì)激素治療的反應(yīng)情況。
　　方法：
　　樣本為鼻內(nèi)鏡手術(shù)中獲取的50例鼻息肉組織（鼻息肉組，圖中用NP組表示）及20例正常下鼻甲黏膜組織（對(duì)照組，圖中用Control組表示），其中鼻息肉組又分為40例無(wú)激素治療組即NP(-GC)組和10例口服糖皮質(zhì)激素治療

4、組即NP(+GC)組。術(shù)中取得的新鮮組織，一部分固定于4％甲醛固定液中，另一部分保存于RNA later中。對(duì)樣本進(jìn)行H&E染色，并對(duì)上皮和嗜酸性粒細(xì)胞進(jìn)行評(píng)估。采用免疫組化染色和實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法測(cè)定對(duì)照組、NP(-GC)組、NP(+GC)組中EGF、EGFR、ERBB4蛋白和mRNA的表達(dá)水平。將EGFR、中性粒細(xì)胞與Alcian Blue染色復(fù)染，研究EGFR與杯狀細(xì)胞的關(guān)系。免疫熒光染色確定陽(yáng)性細(xì)胞類型。應(yīng)用SPSS18.0

5、，比較EGF、EGFR、ERBB4在各組中蛋白及RNA層面的表達(dá)，P值＜0.05，表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.H&E染色評(píng)估:NP(-GC)組中嗜酸性粒細(xì)胞比NP(+GC)組和對(duì)照組多，且NP(-GC)組病人中93％有上皮增生，而NP(+GC)組上皮增生不明顯，對(duì)照組基本不增生。
　　2.EGF、EGFR、ERBB4在蛋白水平的表達(dá)（免疫組化）: EGF、EGFR在對(duì)照都主要著色在基底細(xì)胞，而在NP(-

6、GC)組中EGF及EGFR的染色不同，EGF表達(dá)下降，EGFR表達(dá)升高，且EGFR在杯狀細(xì)胞中亦有所表達(dá)。ERBB4表達(dá)在纖毛細(xì)胞中，在NP(-GC)組表達(dá)比對(duì)照組強(qiáng)。比較NP(-GC)組與NP(+GC)組表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)EGF在NP(+GC)組表達(dá)強(qiáng)于NP(-GC)組，而EGFR、ERBB4在NP(+GC)組中表達(dá)有所下降。
　　3.EGFR與杯狀細(xì)胞的關(guān)系:研究EGFR與杯狀細(xì)胞的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)EGFR表達(dá)在Alcian Blue染

7、色比較弱的杯狀細(xì)胞中而在Alcian Blue染色強(qiáng)的杯狀細(xì)胞中不表達(dá)。
　　4.免疫熒光染色細(xì)胞定位:在對(duì)照組中，EGF與EGFR的陽(yáng)性細(xì)胞均定位在基底細(xì)胞膜上，但在鼻息肉組中，EGF表達(dá)很淺，EGFR則明顯表達(dá)在基底細(xì)胞膜上。ERBB4有所不同，主要表達(dá)在纖毛細(xì)胞的細(xì)胞核上。
　　5.EGF、EGFR、ERBB4在RNA水平的表達(dá):實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示EGF、EGFR、ERBB4在NP(-GC)組表達(dá)顯著下降，與對(duì)