內(nèi)皮祖細(xì)胞與小腸粘膜下層組織的生物相容性研究.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)將大鼠骨髓源性血管內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)與小腸粘膜下層組織(SIS)復(fù)合培養(yǎng),觀察單純EPCs和轉(zhuǎn)染血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165(VEGF165)的EPCs在SIS上的生長(zhǎng)、遷移情況,研究EPCs與SIS在體外的生物相容性。
　　方法:使用密度梯度離心法分離、EG M-2 MV培養(yǎng)基培養(yǎng)擴(kuò)增EP C s,利用p Ad Easy系統(tǒng)構(gòu)建攜有VEG F165的重組腺病毒載體,Ad-VEG F165體外轉(zhuǎn)染EPCs,CCK-8法檢

2、測(cè)轉(zhuǎn)染后EPCs生長(zhǎng)增殖情況,ELISA法檢測(cè)上清中VEGF的分泌量。
　　將單純EPCs、轉(zhuǎn)染VEGF的EPCs、空病毒轉(zhuǎn)染的EPCs分別與SIS進(jìn)行復(fù)合培養(yǎng),CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖情況,掃描電鏡觀察細(xì)胞在SIS上生長(zhǎng)情況,ELISA法檢測(cè)復(fù)合培養(yǎng)后細(xì)胞上清液中VEG F和ANG-1生長(zhǎng)因子的分泌情況。
　　結(jié)果:ELISA法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后EPCs上清中VEGF明顯高表達(dá)。CCK-8結(jié)果顯示復(fù)合培養(yǎng)后EPCs生長(zhǎng)旺盛,轉(zhuǎn)