二甲雙胍格列齊特片人體生物利用度和生物等效性試驗研究——同時測定人血漿二甲雙胍、格列齊特濃度的LC-MS-MS方法及其應用.pdf

1、目的：(1)建立和驗證同時測定人血漿中二甲雙胍、格列齊特濃度的LC/MS/MS方法。 (2)以深圳市中聯制藥有限公司研制的二甲雙胍格列齊特片為受試制劑，以市售格列齊特片(深圳市中聯制藥有限公司生產)及鹽酸二甲雙胍片(中美上海施貴寶制藥有限公司生產)為參比制劑，應用LC/MS/MS法，研究受試制劑與參比制劑的二甲雙胍、格列齊特人體生物利用度和生物等效性。 方法：(1)LC/MS/MS方法建立與確證：以乙腈為血漿蛋白沉淀劑對

2、人血漿樣本進行處理，選用石杉堿甲為內標物，以甲醇/水(含1％甲酸)/乙腈(30/31/39，v/v/v)為流動相、HypersilBDSC18為色譜柱；通過電噴霧電離(ESI)源正離子選擇反應監(jiān)測(SRM)掃描方式進行LC/MS/MS分析，同時測定人血漿中二甲雙胍、格列齊特的濃度，并根據相關指導原則進行特異性、標準曲線、回收率、精密度與準確度、穩(wěn)定性等方面的方法學確證。 (2)二甲雙胍格列齊特片人體生物利用度和生物等效性試驗研究

3、：20例健康成年男性受試者隨機分組，自身對照，單次空腹口服藥物(鹽酸二甲雙胍片500mg及格列齊特片80mg或二甲雙胍格列齊特片500mg/80mg×2)。應用已確證的LC/MS/MS法測定受試者血漿中二甲雙胍和格列齊特的濃度，根據所得血漿濃度-時間數據計算各主要藥代動力學參數。 結果：(1)建立了同時測定人血漿中二甲雙胍、格列齊特濃度的LC/MS/MS方法，方法學驗證結果表明，該方法特異性好，無內源性雜質干擾。二甲雙胍在7.8

4、～4678.9μg/L范圍線性良好，定量下限為7.8μg/L；格列齊特在10～10000μg/L范圍線性良好，定量下限為10μg/L。二甲雙胍批內RSD為5.8％～8.2％，批間RSD為5.1％～7.3％；格列齊特批內RSD為7.5％～10.7％，批間RSD為8.1％～12.5％。二甲雙胍的平均提取回收率為71.0％～83.6％，平均相對回收率為96.1％～109.4％；格列齊特的平均提取回收率為88.1％～104.0％，平均相對回收率

5、為91.5％～103.7％。血漿樣品在室溫放置4h，二甲雙胍偏差為-11.0％～-6.5％，格列齊特偏差為7.9％～10.6％。血漿樣品凍融2次，二甲雙胍偏差為-2.1％～2.7％，格列齊特偏差為10.0％～11.3％。血漿樣品提取液在室溫放置12h，二甲雙胍偏差為0.8％～5.6％，格列齊特偏差為-3.5％～1.8％。血漿樣品冰凍(-30℃)39d，二甲雙胍偏差為-16.7％～7.4％，格列齊特偏差為-1.6％～11.8％。

6、(2)二甲雙胍格列齊特片人體生物利用度和生物等效性試驗研究結果：參比制劑與受試制劑二甲雙胍的Cmax分別為1161.7±307.9μg/L及1264.4±275.0μg/L；Tmax分別為1.9±1.0h及2.0±0.8h；t1/2分別為4.6±0.9h及4.1±0.6h；AUC0-t分別為7132.9±1956.1μg/L·h及7758.5±2096.4μg/L·h；AUC0→∞分別為7287.3±1988.9μg/L·h及8063.

7、6±2069.0μg/L·h；受試制劑相對于參比制劑的生物利用度為111.2％±23.6％；90％可信限：Cmax為101.7％～119.4％，AUC0-t為99.8％～118.5％，AUC0→∞為99.9％～123.3％。參比制劑與受試制劑格列齊特的Cmax分別為4958.8±771.2μg/L及5266.7±880.2μg/L；Tmax分別為3.9±0.8h及3.5±1.0h；t1/2分別為12.6±4.8h及12.4±4.4h；A

8、UC0-t分別為75804.7±34103.4μg/L·h及76752.9±33971.9μg/L·h；AUC0→∞分別為82114.4±43993.4μg/L·h及81567.9±44203.9μg/L·h；受試制劑相對于參比制劑的生物利用度為103.4％±16.6％；90％可信限：Cmax為100.5％～111.8％，AUC0-t為95.5％～109.2％，AUC0→∞為92.4％～107.4％。 結論：(1)建立和確證了一