乳腺癌危險因素及其遺傳易感性的分子流行病學(xué)研究.pdf

1、我國女性乳腺癌的發(fā)病率雖然較低，但近二十余年乳腺癌的發(fā)病率呈明顯上升趨勢，目前已成為威脅我國女性健康的最重要的疾病之一。乳腺癌的發(fā)生是遺傳和環(huán)境因素交互作用的結(jié)果，其確切的發(fā)病原因尚不明確。流行病學(xué)、臨床和遺傳學(xué)研究確定了多個生物和社會因素可能導(dǎo)致乳腺癌發(fā)生的危險性增加。目前確定的多個可能引起乳腺癌危險性增加的因素大多與體內(nèi)雌激素水平或/和雌激素暴露時間有關(guān)。由于女性月經(jīng)、生殖因素與體內(nèi)性激素的暴露水平或/和暴露時間有密切的關(guān)系，因此目

2、前國內(nèi)外有關(guān)月經(jīng)、生殖因素與乳腺癌關(guān)系的研究進行不少，但結(jié)論尚不一致，主要與研究的樣本量、不同人群的社會經(jīng)濟狀況等因素有關(guān)。也有研究認為內(nèi)源性性激素的暴露聯(lián)合腫瘤的雌激素受體(ER)和孕激素受體(PR)狀態(tài)與乳腺癌的發(fā)病有關(guān)。但目前有關(guān)人體內(nèi)類固醇性激素水平與乳腺癌關(guān)系的研究多為高加索人群，而中國人群體內(nèi)類固醇性激素水平較西方人群低，因此有必要在中國人群中進行體內(nèi)類固醇性激素水平及ER/PR狀態(tài)與乳腺癌關(guān)系的研究。在乳腺癌發(fā)病過程中，不

3、同個體對環(huán)境暴露的反應(yīng)存在易感性，目前認為大部分乳腺癌的遺傳易感性與常見的低共顯性基因的變異有關(guān)。雌激素作為重要的致癌因子在乳腺癌的發(fā)生過程中起著重要的作用，雌激素致癌作用的一個重要機制是雌激素代謝產(chǎn)物能夠引起DNA的氧化損傷并導(dǎo)致DNA的單鏈斷裂。有研究表明乳腺癌患者及其一代直系親屬存在DNA修復(fù)能力缺陷，另外乳腺癌易感基因BRCA1、BRCA2在DNA修復(fù)過程中起重要作用。因此，由DNA修復(fù)基因單核苷酸多態(tài)性(SNPs)導(dǎo)致的人體D

4、NA修復(fù)能力改變可能與乳腺癌的遺傳易感性有關(guān)。在DNA修復(fù)通路中尋找與乳腺癌遺傳易感性相關(guān)的功能性多態(tài)性位點是目前的一個研究熱點。 本研究旨在通過宏觀流行病學(xué)、血清流行病學(xué)和分子流行病學(xué)相結(jié)合的研究手段，采用病例對照研究方法，對月經(jīng)、生殖因素，體內(nèi)性激素暴露水平以及與人體DNA修復(fù)能力相關(guān)的重要基因功能性SNPs單獨或聯(lián)合與中國人群乳腺癌的關(guān)系進行研究，研究結(jié)果在進一步闡明乳腺癌的發(fā)病機制和發(fā)現(xiàn)與我國人群乳腺癌易感性相關(guān)的危險基

5、因型，并將其作為分子標志物用于篩選高危人群或易感個體從而實施目標明確的個體預(yù)防等方面具有重要的理論和實踐意義。 第一部分月經(jīng)、生殖因素與乳腺癌關(guān)系的病例對照研究采用病例對照研究，對經(jīng)病理確診的488例乳腺癌病例和482例對照進行月經(jīng)、生殖因素與乳腺癌關(guān)系的單因素和多因素的logistic回歸分析，評價江蘇地區(qū)女性月經(jīng)、生殖因素與乳腺癌發(fā)病危險的關(guān)系。 單因素logistic回歸分析結(jié)果顯示，與初潮年齡≤15歲者相比，初潮

6、年齡為16、17及≥18歲者的OR值(95﹪CI)分別為0.50(0.35-0.71)、0.31(0.21-0.45)和0.28(0.19-0.41)；與活產(chǎn)數(shù)為1者相比，活產(chǎn)數(shù)為2、3和≥4者的OR值(95﹪CI)分別為0.58(0.41-0.82)、0.51(0.31-0.83)和0.29(0.16-0.49)，說明初潮年齡大、活產(chǎn)數(shù)多能降低乳腺癌的發(fā)病危險性；而首胎活產(chǎn)年齡≥27歲者患乳腺癌的危險性是≤22歲的2.43倍(95﹪C

7、I=1.62-3.46)，說明首胎活產(chǎn)年齡大患乳腺癌的危險性增加；有流產(chǎn)史和無母乳喂養(yǎng)史者患乳腺癌的危險性亦增加[OR值(95﹪CI)分別為1.65(1.26-2.16)、1.99(1.31-3.04)]。多因素logistic回歸分析結(jié)果與單因素分析結(jié)果較為一致。研究結(jié)果表明，月經(jīng)、生殖因素在江蘇地區(qū)女性乳腺癌的發(fā)病過程中起重要作用。 第二部分血漿性激素水平與雌(孕)激素受體在絕經(jīng)后女性乳腺癌發(fā)生中的交互作用研究采用病例對照研

8、究，使用放射免疫方法直接檢測199名絕經(jīng)后乳腺癌病例和214名絕經(jīng)后健康對照的血漿中雌二醇及睪酮的水平，運用logistic回歸模型分析血漿性激素水平與乳腺癌的關(guān)系，同時分析雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)狀態(tài)與血漿雌二醇和睪酮水平在乳腺癌發(fā)生過程中的交互作用。研究結(jié)果顯示，與血漿中含低水平雌二醇或睪酮者相比，血漿中含高水平雌二醇者乳腺癌的危險性顯著升高(OR=1.97，95﹪CI=1.18-3.29)；血漿中含高水平睪酮者乳腺癌

9、的發(fā)病危險性升高，接近統(tǒng)計學(xué)顯著性水平(OR=1.62，95﹪CI=0.95-2.77)。按ER、PR狀態(tài)分層分析后顯示，體內(nèi)含高水平雌二醇或睪酮的絕經(jīng)后女性與低水平組比較患ER、PR均陽性乳腺癌的危險性分別升高3.93倍(OR=3.93，95﹪CI=1.48-10.46)或4.08倍(OR=4.08，95﹪CI=1.55-10.77)，但未發(fā)現(xiàn)血漿中雌二醇、睪酮水平與ER、PR均陰性的乳腺癌有關(guān)。同時，高水平雌二醇與ER/PR陽性在乳

10、腺癌的發(fā)生中呈顯著的交互作用(OR交互=2.13，95﹪CI=1.10-4.13)。研究結(jié)果表明，體內(nèi)高水平的雌二醇、睪酮暴露能顯著增加絕經(jīng)后女性乳腺癌特別是ER、PR均陽性乳腺癌的發(fā)病危險性，且雌二醇和ER/PR間存在顯著的交互作用。 第三部分DNA修復(fù)基因XRCC1、ADPRT功能性單核苷酸多態(tài)性與乳腺癌遺傳易感性關(guān)系的病例對照研究XRCC1和ADPRT是機體修復(fù)DNA堿基損傷和單鏈斷裂損傷過程中的關(guān)鍵酶，XRCC1和ADP

11、RT基因中可能引起DNA堿基損傷修復(fù)功能降低的多態(tài)改變可能與腫瘤的易感性有關(guān)。本病例對照研究選擇456名乳腺癌病例和487名對照，對位于XRCC1基因啟動子區(qū)的T-77C多態(tài)性以及引起氨基酸改變的多態(tài)性位點Arg194Trp(C/T)，Arg280His(G/A)和Arg399Gln(G/A)和ADPRTVal762Ala(T/C)的多態(tài)性改變與中國人群乳腺癌的遺傳易感性進行研究。結(jié)果顯示，XRCC1-77T＞C、Arg194Trp、A

12、rg280His、Arg399Gln和ADPRTVal762Ala多態(tài)性位點的變異等位基因在對照中的頻率分別為0.116、0.290、0.119、0.270和0.444；在病例中的頻率則分別為0.102、0.300、0.121、0.257和0.417，各位點等位基因頻率在病例和對照間的分布均無統(tǒng)計學(xué)顯著性差異。多元logistic回歸分析顯示，XRCC1-77變異型雜合子CT和變異型純合子CC均與乳腺癌的發(fā)病危險性無關(guān)(CT基因型的調(diào)整

13、OR=0.90，95﹪CI=0.63-1.29，CC基因型的調(diào)整OR=0.95，95﹪CI=0.23-4.04)。同樣，多元logistic回歸分析也表明Arg194Trp、Arg280His和Arg399Gln多態(tài)性以及ADPRTVal762Ala多態(tài)性均與乳腺癌的發(fā)病危險性無顯著關(guān)聯(lián)。分層分析及多個位點的聯(lián)合分析也均未發(fā)現(xiàn)XRCC1、ADPRT的多態(tài)改變與乳腺癌的發(fā)病危險性有關(guān)。研究結(jié)果表明，XRCC1-77T＞C、Arg194Tr

14、p、Arg280His、Arg399Gln和ADPRTVal762Ala多態(tài)改變可能與中國人群的乳腺癌發(fā)病危險性無關(guān)。 第四部分胸苷酸合酶基因功能性多態(tài)性與乳腺癌遺傳易感性關(guān)系的病例對照研究流行病學(xué)研究資料顯示，飲食中葉酸供應(yīng)不足可導(dǎo)致乳腺癌發(fā)病危險性升高。參與葉酸代謝的關(guān)鍵酶的多態(tài)改變可能通過影響DNA甲基化以及DNA的合成而與腫瘤易感性有關(guān)。 胸苷酸合酶(TYMS)通過將dUMP轉(zhuǎn)化為dTMP提供DNA合成和修復(fù)過程

15、所必須的胸腺嘧啶脫氧核苷。在TYMS基因5，端啟動子的增強子區(qū)有一含3個(TSER3R)或2個(TSER2R)28bp的重復(fù)序列多態(tài)性，在TYMS基因3’端非翻譯區(qū)(TS3，-UTR)1494bp有一個6bp核苷酸片段的缺失(TS3'-UTRdel6)或插入(TS3'-UTRins6)多態(tài)性。這兩個TYMS基因變異可能具有功能性的改變，因而可能與乳腺癌的遺傳易感性有關(guān)。為驗證這一假設(shè)，我們通過較大樣本的乳腺癌病例對照研究(444例病例和

16、473例對照)，對TYMS基因TSER2R/3R和TS3’-UTRdel6/ins6多態(tài)性與中國人群乳腺癌遺傳易感性的關(guān)系進行研究。 結(jié)果顯示，TS3'-UTRdel6/ins6多態(tài)性位點三種基因型的頻率分布在病例和對照間有統(tǒng)計學(xué)顯著性差異(P=0.035)。多元logistic回歸分析顯示，與攜帶野生型純合子TS3'-UTRdel6/del6者相比，攜帶ins6/ins6突變型純合子的個體患乳腺癌的危險性降低41﹪(調(diào)整OR=

17、0.59，95﹪CI=0.36-0.97)，但攜帶雜合子del6/ins6者乳腺癌的發(fā)病危險性沒有明顯改變(調(diào)整OR=1.09，95﹪CI=0.81-1.45)。分層分析結(jié)果顯示，攜帶TS3’UTRins6/ins6基因型的保護作用在大年齡(＞48歲)、絕經(jīng)后以及月經(jīng)初潮晚(≥16歲)的女性個體更為明顯。本次研究中我們未發(fā)現(xiàn)TSER2R/3R多態(tài)性與中國人群的乳腺癌發(fā)病危險性有關(guān)。研究結(jié)果表明，TS3’-UTRdel6多態(tài)改變可能與中國