幾種名貴洋蘭轉(zhuǎn)基因受體系統(tǒng)的建立及遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、　　研究了蝴蝶蘭、大花蕙蘭和文心蘭轉(zhuǎn)基因受體系統(tǒng)的建立和抗病基因轉(zhuǎn)化，結(jié)果表明：　　(1)由蝴蝶蘭種子播種可獲得大量無菌材料，在Hyponex培養(yǎng)基上，蔗糖濃度為25g/L時(shí)，種子萌發(fā)情況最好；也可從花梗節(jié)芽誘導(dǎo)營養(yǎng)芽從而建立快繁無菌體系，營養(yǎng)芽增殖的最佳激素組合為6-BA7.5mg/L+NAA1.0mg/L；在6-BA10.0mg/L+NAA1.0mg/L的激素組合下，從無菌苗的葉片誘導(dǎo)類原球體的誘導(dǎo)率最高可達(dá)87.0﹪，1/2MS

2、和Hyponex基本培養(yǎng)基對類原球體的增殖和分化效果較好；蔗糖濃度對類原球莖分化成苗的影響可用二次曲線擬合，在濃度為20g/L時(shí)，分化率達(dá)最高?！　?2)基因型對大花蕙蘭叢生芽增殖有顯著影響，差異的顯著性在不同基因型間達(dá)不同水平，離散性和集中性具有分組特性；影響大花蕙蘭叢生芽增殖系數(shù)差異的主要因子是細(xì)胞分裂素的濃度水平，二者關(guān)系可用二次式模型擬合；激素對愈傷組織的誘導(dǎo)和體胚發(fā)生的影響達(dá)極顯著差異，2，4-D濃度升高，愈傷組織誘導(dǎo)率增加

3、，但高于2.0mg/L時(shí)，外植體褐化死亡，KT是體胚發(fā)生的關(guān)鍵因子，其作用受到2，4-D的抑制和低濃度NAA的促進(jìn)；石蠟切片觀察表明，大花蕙蘭體胚發(fā)生經(jīng)過球形胚、魚雷胚，最后發(fā)育成子葉胚，形成具有完整植株特性的原球莖。　　(3)以文心蘭花梗為材料，在6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L的1/2MS培養(yǎng)基上，花梗營養(yǎng)芽的誘導(dǎo)率可達(dá)60﹪；花梗營養(yǎng)芽的莖段，在6-BA0.2mg/L+NAA1.0mg/L的培養(yǎng)基上，愈傷組織誘導(dǎo)率最