肺癌相關(guān)microRNAs篩選與生物學(xué)功能研究.pdf

1、東南大學(xué)碩士學(xué)位論文肺癌相關(guān)micrNAs篩選與生物學(xué)功能研究姓名：王希愷申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：浦躍樸；梁戈玉20120604東南大學(xué)碩二學(xué)位論文其中MAP3KIl作為miR125b的潛在靶基因之～，在miR125b對MAPK信號傳導(dǎo)通路的調(diào)控中可能具有重要作用；miR27具有調(diào)節(jié)神經(jīng)發(fā)育及細(xì)胞周期等功能，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)其與非小細(xì)胞性肺癌等多種腫瘤關(guān)系密切，并且可能通過參與ErbB、MAPK和wnt等信號傳

2、導(dǎo)通路的調(diào)節(jié)影響肺癌的發(fā)生發(fā)展。三、肺癌相關(guān)miRNAs生物學(xué)功能研究通過轉(zhuǎn)染mimics和inhibitor，分別上調(diào)和下調(diào)95D細(xì)胞中miR125b和miR27a的表達(dá)水平，通過四甲基偶氮嘩鹽(MTT)法、流式細(xì)胞儀、Transwelldx室技術(shù)檢測miRNAs表達(dá)改變對95D細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期和細(xì)胞侵襲力的影響。結(jié)果顯示，與陰性對照組相比，miR125b表達(dá)顯著上調(diào)后，細(xì)胞凋亡率顯著下降；miR125b表達(dá)顯著下調(diào)后，細(xì)

3、胞凋亡率顯著升高，細(xì)胞周期產(chǎn)生G1期阻滯，細(xì)胞侵襲率明顯減弱，提示miR125b可通過對細(xì)胞周期、凋亡和侵襲力的影響促進(jìn)肺癌的發(fā)展。與陰性對照組相比，miR27a表達(dá)顯著上調(diào)后，細(xì)胞增殖和侵襲能力明顯增加，細(xì)胞凋亡率顯著下降，細(xì)胞周期S期阻滯；miR27a表達(dá)顯著下調(diào)后，細(xì)胞增殖和侵襲能力明顯下降，細(xì)胞周期產(chǎn)生Gl期阻滯，但對細(xì)胞凋亡影響不明顯，提示miR27a可通過對細(xì)胞增殖、周期、凋亡和侵襲力的影響促進(jìn)肺癌的發(fā)展。四、肺癌相關(guān)miR

4、NAs靶基因調(diào)控研究通過轉(zhuǎn)染mimics和inhibitor的分別上調(diào)和下調(diào)95D細(xì)胞中miR125b和miR27a的表達(dá)水平，通過Westernblotting技術(shù)分別檢測miR125b對MAP3K11，miR27a對PLK2的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果顯示，miR125b表達(dá)顯著下調(diào)后，MAP3K1l表達(dá)顯著上升，但miR125b表達(dá)上調(diào)對MAP3K11表達(dá)影響不明顯，結(jié)合生物信息學(xué)和生物學(xué)功能的研究結(jié)果，提示miR125b可能通過對MAP3K

5、1l的負(fù)向調(diào)控影響肺癌細(xì)胞的凋亡。上調(diào)及下調(diào)miR27后，PLK2表達(dá)水平?jīng)]有發(fā)生明顯改變，未發(fā)現(xiàn)miR27a對PLK2具有調(diào)節(jié)作用。綜上所述，本研究通過對95D與16HBE細(xì)胞的miRNAs表達(dá)譜進(jìn)行差異性比較分析，篩選出45個(gè)肺癌相關(guān)miRNAs；生物信息學(xué)分析顯示，這些miRNAs主要調(diào)控MAPK等多個(gè)腫瘤相關(guān)的信號傳導(dǎo)通路，并且與非小細(xì)胞肺癌等多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)；生物學(xué)功能與靶基因調(diào)控研究顯示，miR125b可通過對細(xì)胞