細(xì)胞內(nèi)鈣超載、細(xì)胞骨架與腸上皮細(xì)胞損傷防治研究.pdf

1、本文采用體外原代培養(yǎng)胎鼠IEC，建立人工細(xì)胞基底膜，模擬缺血缺氧損傷及采用鈣通道阻斷劑觀察IEC脫落、凋亡與細(xì)胞內(nèi)鈣含量的關(guān)系，探索細(xì)胞內(nèi)鈣超載引起細(xì)胞骨架、細(xì)胞膜蛋白、基因表達(dá)的改變和鈣通道阻斷劑的影響。 方法：將胎鼠IEC分離與原代培養(yǎng)；建立人工基底膜，然后進(jìn)行缺血缺氧環(huán)境模擬；再分為：對照組(A組)，缺氧組(B組)，缺血組(C組)，缺血缺氧組(D組)；各組在實驗條件下2h后進(jìn)行檢測；檢測指標(biāo)為細(xì)胞脫落率、細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞骨

2、架、鈣通道電流、細(xì)胞內(nèi)鈣含量、膜蛋白運動及構(gòu)像。最后抽提細(xì)胞的mRNA，逆轉(zhuǎn)錄熒光標(biāo)記mRNA，采用大鼠基因表達(dá)譜芯片檢測各組IEC基因表達(dá)譜，并對比分析檢測結(jié)果。 結(jié)論：缺血缺氧損傷后，IEC出現(xiàn)脫落、凋亡，細(xì)胞骨架F-actin、talin和α-actin的形態(tài)、分布及熒光強度均發(fā)生變化，尤以缺血缺氧聯(lián)合損傷為重；一些與凋亡相關(guān)的基因發(fā)生了差異表達(dá)；膜蛋白的變化及鈣通道的開放可能是引起鈣超載的原因；利用鈣通道阻斷劑可降低細(xì)胞內(nèi)