鉀離子通道在小鼠精子獲能中的作用及氰戊菊酯對獲能的影響機制.pdf

1、第一部分鉀離子通道在小鼠精子體外獲能中的作用以金霉素(chlortetracycline,CTC)熒光染色法評價小鼠精子的體外獲能,并觀察K<'+>離子載體纈氨霉素(Val)對小鼠精子體外獲能的影響,CTC熒光染色后涂片觀察,以B型精子的發(fā)生率來評價精子獲能,B型精子發(fā)生率越高,獲能越完全.鉀離子載體纈氨霉素能促使體細胞鉀離子外流,實驗以終濃度為50nmol·L-1的纈氨霉素處理小鼠精子,其B型精子發(fā)生率(％)與對照組相比顯著增加(n=

2、10,p<0.05),表明纈氨霉素能促進小鼠精子的體外獲能,由于纈氨霉素能促使體細胞內(nèi)鉀離子外流,提示在精子體外獲能過程中,鉀離子外流是重要的一環(huán).進一步采用全細胞膜片箝技術記錄小鼠粗線期精母細胞延遲整流鉀電流(I<,DRK>),并分析其電流特性,同時觀察纈氨霉素對I<,DRK>的影響.結(jié)果顯示:在小鼠粗線期精母細胞上能記錄到一個被緩慢激活的外向鉀電流,其幅度隨去極化電壓的升高而增大,該電流的上升幅度具有明顯的電壓依賴性,但通道的開放沒

3、有明顯的時間依賴性失活.該實驗使用的電極內(nèi)液含有10mmol·L<'-1>的Ca<'2+>螯合劑EGTA,可有效地防止胞內(nèi)游離Ca<'2+>濃度升高,因此該外向鉀電流中基本不包含Ca<'2+>激活的鉀通道電流,而且該電流對4-AP不敏感,但TEACl可顯著抑制該電流,因此可初步判斷該電流為延遲整流鉀電流(I<,DRK>).第二部分氰戊菊酯對小鼠精子獲能的影響及機制探討我們進一步探討了Fen抑制小鼠精子體外獲能機制,發(fā)現(xiàn)氰戊菊酯可輕微抑制