細胞周期檢測點的調控：ATM及chk1-2反義基因治療白血病的研究.pdf

1、華中科技大學同濟醫(yī)學院博士學位論文細胞周期檢測點的調控：ATM及chk1/2反義基因治療白血病的研究姓名：湯屹申請學位級別：博士專業(yè)：血液內科指導教師：劉文勵2002.5.1竺! 型墊盔蘭旦疊墮蘭墮————————————壁蘭蘭! ! ! 鯊染率約為5 ％一2 5 ％之間，并在2 4 —7 2 小時之間存在轉染率的一個高峰和衰減的動態(tài)過程，3 6 小時為高峰期，7 2 小時轉染率有較大衰減，而且原代細胞較H L - - 6 0 細胞株更

2、難于轉染。2 ． 檢測了2 2 例白血病患者，其中包括急性髓性白血病( A M L ) 患者1 5 例( M 26 例，M 3 5 例，M 5 4 例) 、慢性粒細胞性白血病( C M L ) 患者7 例( 慢性期5 例，加速期1 例，急變期1 例) 和9 種腫瘤細胞株，發(fā)現在上述原代白血病細胞和腫瘤細胞株中，A T M 基因的m R N A 的表達普遍存在降低和缺失現象。，，，結論：由于質粒對原代白血病細胞的轉染率不太理想，而且轉染陽

3、性細胞維持時間不長，這將影響A T M 反義封閉的效果。另外，A T M 基因本身在某些白血病及其他腫瘤細胞中就有表達量的缺失和減低，因此，對于這些病例，反義封閉A T M 基因將收效甚微。總之，質粒P z e o S V 2 ／A T MP 1 3 K 反義封閉A T M 基因治療原代白血病細胞的可行性有待進一步商榷。第二章．腫瘤細胞對放射線照射及化療損傷后表現的細胞周期阻滯現象及其與A T M 表達量之間的關系，目的：了解非同步化的

4、正常人外周血單個核細胞及部分腫瘤細胞株對放射線和化防法結果：療藥所表現的細胞周期和凋亡的變化。同時觀察其與A T M 表達量的關系。以6 G y 、1 0G y 不同劑量的C o 一6 0 照射正常人外周血單個核細胞及白血病細胞株H L 一6 0 、K 5 6 2 ，宮頸癌細胞株S i H A ，子宮內膜癌細胞株1 1 3 ，分別于6 h ，1 2 h ，2 4 h ，6 0 h 等時間點觀察其細胞周期和凋亡的變化。同時以R T - P

5、 C R 和流式細胞儀測量其A T M 的R N A 及蛋白的表達量，以觀察細胞周期和凋亡的變化與A T M 表達量之間的關系。S i H A 細胞株A T M 的R N A 表達量是H L ．6 0 細胞株的約8 倍，A T M 蛋白表達量為H L - 6 0 細胞株的2 倍，H L - - 6 0 的放射敏感性較S i H A 強?！?。b結論：1 ．S i H A 與H L - 6 0 放射敏感性與A T M 的表達量相關，A T