采用SELDI技術(shù)篩選乳腺癌新輔助化療療效相關(guān)的蛋白譜.pdf

1、目的:
　　 本研究旨在應(yīng)用生物大分子表面加強(qiáng)的激光解析/電離化時(shí)間—飛行質(zhì)譜儀結(jié)合配套的蛋白質(zhì)芯片技術(shù)檢測乳腺癌新輔助化療前后癌組織內(nèi)蛋白質(zhì)譜的變化，篩選新輔助化療療效相關(guān)的蛋白譜。進(jìn)一步探索由于TNM分期、患者年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況及ER、PR、HER-2等的差異對新輔助化療的影響。比較臨床有效組與無效組之間蛋白峰差異，進(jìn)而篩選有療效預(yù)測價(jià)值的相關(guān)蛋白譜。
　　 方法:
　　 64例乳腺癌患者入組，于新輔助化療

2、前行粗針穿刺獲得乳腺癌組織，采用FEC方案或ET方案（氟尿嘧啶500mg/m2，第1天;表阿霉素100mg/m2，第1天;環(huán)磷酰胺500mg/m2，第1天;或表阿霉素75ms/m2，第1天;多西他賽80mg/m2，第1天;兩方法均為每3周重復(fù)）化療3-4個(gè)周期后手術(shù)治療，術(shù)中取樣。所取樣本分裝后，一部分在液氮中快速冷凍后放入-80℃凍存，另一部分經(jīng)福爾馬林固定后準(zhǔn)備做免疫組化染色。取適量樣品在液氮中研磨，利用蛋白提取試劑盒提取組織蛋白，

3、采用K5600檢測蛋白濃度。組織蛋白液經(jīng)處理后上機(jī)得到質(zhì)譜圖，所得數(shù)據(jù)采用Biomarkerwizard軟件分析，得到蛋白峰度值。新輔助化療前后的峰度值分別根據(jù)TNM分期分為Ⅱ和Ⅲ級兩組，患者年齡≤50歲和＞50歲兩組，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移≤4個(gè)和＞4個(gè)淋巴結(jié)兩組及ER、PR、HER-2陰性及陽性等分為兩組，后利用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。新輔助化療療效評估根據(jù)RECIST標(biāo)準(zhǔn)，將新輔助化療患者分為有效組與無效組，并比較化療前兩者間的蛋白譜

4、差別。
　　 結(jié)果:
　　 采用Mann-Whitney秩和檢驗(yàn)，得出化療前后差異蛋白峰5825.89Da、8949.50Da、11053.48Da、11652.02Da、17898.94Da、22250.63Da、38546.56Da。以上7個(gè)蛋白峰化療后均較化療前增高。有效組和無效組比較得出差異蛋白峰5360、9089、10528、13445、15118、44065Da。在TNM分期、年齡、癌灶大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及

5、ER、PR、HER-2的分類中，8949.50Da、17898.94Da、38546.56Da等峰表現(xiàn)出差異?；熐昂竺庖呓M化染色變化明顯的有18例，將其與無明顯變化的46例比較，其中38546.56Da在兩組患者化療前的樣本中有差異，8949.50Da及17898.94Da在兩組患者化療后的樣本中有差異。
　　 結(jié)論:
　　 1.采用SELDI技術(shù)能夠篩選到新輔助化療相關(guān)差異峰，結(jié)合臨床療效可篩選到新輔助化療療效的預(yù)測