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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:選取五倍子、白芷和白芨三味中藥的主要成份沒食子酸、厚樸酚及白芨多糖三者配伍制成復(fù)方中藥制劑,作用于浮游及生物膜狀態(tài)下的感染根管內(nèi)常見菌,觀察其抗菌作用,探討復(fù)方中藥制劑作為根管封閉劑中抗菌藥物的可行性。
方法:實(shí)驗(yàn)分為二個(gè)部分進(jìn)行1、對(duì)浮游狀態(tài)下感染根管內(nèi)常見菌的抗菌作用:選擇感染根管內(nèi)3種常見菌:黏性放線菌(Av)、糞腸球菌(Ef)、具核梭桿菌(Fn)作為實(shí)驗(yàn)菌株,并按照中藥組方原則選取沒食子酸、厚樸酚、白芨多糖三
2、者的粉劑溶解于二甲基亞砜(DMSO)制成復(fù)方中藥制劑,采用液體二倍稀釋法,測(cè)定復(fù)方中藥制劑對(duì)上述標(biāo)準(zhǔn)菌株浮游狀態(tài)細(xì)菌的最小抑菌濃度和最小殺菌濃度;同時(shí)設(shè)陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照組。
2、對(duì)生物膜狀態(tài)下感染根管內(nèi)常見菌的抗菌作用:首先,將上述三種實(shí)驗(yàn)菌培養(yǎng)成單菌生物膜及3種細(xì)菌的混合生物膜;然后,把復(fù)方中藥制劑作用于已形成的生物膜,利用激光共聚焦顯微鏡觀察,定量研究各生物膜的厚度變化和生物膜各層的細(xì)菌活性;同時(shí),設(shè)陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)
3、照以及空白對(duì)照組;結(jié)果采用SAS6.12軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
結(jié)果:
1、通過液體二倍稀釋法測(cè)得了復(fù)方中藥制劑對(duì)上述三種實(shí)驗(yàn)菌株的MIC和MBC值,同時(shí)測(cè)得氧化鋅溶液對(duì)Av以及Fn的MIC和MBC值,DMSO對(duì)Fn的MIC和MBC值。但未測(cè)得氧化鋅溶液對(duì)Ef的MIC和MBC值,也未測(cè)得DMSO對(duì)Av和Ef的MIC和MBC值。
2、觀察Av、Ef、Fn形成的單菌生物膜及混合生物膜,其中間層的細(xì)菌密度最
4、高,明確了生物膜內(nèi)的細(xì)菌主要集中在中間層,但各層的活菌百分比無顯著性差異。在使用中藥制劑后,各單菌生物膜及混合生物膜的厚度均有所降低,但降低程度與陽(yáng)性對(duì)照組和陰性對(duì)照組均無顯著性差異;同時(shí),F(xiàn)n單菌生物膜和三菌的混合生物膜各層的活菌百分比均有顯著性改變,而對(duì)于兼性厭氧菌Av和Ef,用藥前后其生物膜各層的活菌百分比無顯著性差異。
結(jié)論:生物膜內(nèi)的細(xì)菌主要集中在中間層,內(nèi)、外層細(xì)菌較稀疏,各層的活菌百分比無顯著性差異;由沒食子
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