非淀粉多糖酶在奧尼羅非魚飼料中的應(yīng)用及其作用機理的研究.pdf

1、本課題研究了在飼料中添加非淀粉多糖酶對羅非魚和鯉魚的生長性能和消化率的影響及對羅非魚消化酶、免疫等作用的機理。 試驗一：研究了羅非魚餌料中噴涂液體非淀粉多糖酶在水中穩(wěn)定性。結(jié)果表明，添加了復(fù)合酶的飼料在投放入水中1小時之內(nèi)，依然能保持較高酶活性，說明該酶制劑在水中的穩(wěn)定性較好，為非淀粉多糖酶在水產(chǎn)動物中的應(yīng)用提供了很好的前提。 試驗二：研究了添加非淀粉多糖酶對奧尼羅非魚飼料養(yǎng)分消化率、血液生化及免疫功能的影響。試驗選用體

2、重約60克的奧尼羅非魚(Oreochromisniloticus×O.aureus)560尾，隨機分成4個處理組，每組7個重復(fù)，每重復(fù)20尾奧尼羅非魚，分別添加不同梯度水平的液體酶制劑(0、0.01％、0.02％、0.04％)。結(jié)果表明：1.奧尼羅非魚飼料中添加非淀粉多糖酶對羅非魚的特定生長率、飼料系數(shù)等生產(chǎn)性能均有顯著影響(P＜0.05)；2.添加復(fù)合酶制劑顯著提高了奧尼羅非魚的干物質(zhì)、粗蛋白、能量和某些氨基酸的消化率(P＜0.05)

3、；3.添加復(fù)合酶制劑能顯著提高奧尼羅非魚魚體成分中的粗蛋白質(zhì)含量(P＜0.05)，0.04％組顯著降低了粗灰分、鈣、磷的含量(P＜0.05)；4.奧尼羅非魚飼料中添加非淀粉多糖酶提高了血清總蛋白的含量，但差異不顯著(P＞0.05)；顯著降低了血清中甘油三酯、血糖和血清尿素氮的含量(P＜0.05)；顯著提高了血液中T3和T4的含量，而胰島素的含量變化沒有規(guī)律。 試驗三：研究了不同溫度和pH值對奧尼羅非魚蛋白酶和淀粉酶活性的影響。結(jié)

4、果表明，奧尼羅非魚肝臟蛋白酶活性在相同測定條件下遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于腸道蛋白酶活性。蛋白酶的最適溫度均為55℃，最適pH均為8.0。隨溫度變化淀粉酶活性變化不大，在40℃時，淀粉酶活性最高。在pH5.8-6.2范圍內(nèi)，淀粉酶活性最高。 試驗四：研究了非淀粉多糖酶對羅非魚蛋白酶、淀粉酶活性影響的研究。本研究于喂料前、喂料后1、3、5小時四個時間點，分別對非淀粉多糖酶不同添加量各組進(jìn)行組織采樣，綜合研究了添加非淀粉多糖酶對羅非魚肝臟、腸道(前、

5、中后腸)蛋白酶和淀粉酶的影響。結(jié)果顯示：1.蛋白酶活性分別按肝胰臟、胃、腸道依次升高；2.添加0.04％非淀粉多糖酶組羅非魚肝胰臟、胃蛋白酶活性最大，均顯著高于對照組；3.添加非淀粉多糖酶對前腸蛋白酶影響規(guī)律不一致，但總體以添加0.01％非淀粉多糖酶組最高；4.除喂后5小時采樣結(jié)果外，其它時間采樣檢測結(jié)果均以添加0.01％非淀粉多糖酶組中后腸蛋白酶活性最高，顯著高于對照組(P＜0.05)；5.適量添加非淀粉多糖酶對肝臟淀粉酶活性影響不大

6、，高量添加非淀粉多糖酶(0.04％)對肝胰臟淀粉酶活性具有抑制作用；添加非淀粉多糖酶一定程度上提高了前、中后腸淀粉酶活性。 試驗五：研究了非淀粉多糖酶對羅非魚肝胰臟淀粉酶活性和α-淀粉酶基因表達(dá)的影響，并克隆得到了羅非魚α-淀粉酶的cDNA部分序列。研究與分析了添加不同水平的非淀粉多糖酶(0、0.01％、0.02％、0.04％)對羅非魚在喂料前和喂料后5h的肝胰臟淀粉酶活性和α-淀粉酶的基因表達(dá)。結(jié)果顯示，喂料前和喂料后5h分別

7、取樣檢測，0.04％的酶添加量組的淀粉酶活性和α-淀粉酶mRNA表達(dá)量均顯著低于其他三組(P＜0.01)。從淀粉酶活性和基因表達(dá)分析都表明，適量添加非淀粉多糖酶時，羅非魚肝胰臟淀粉酶活性和基因表達(dá)都變化不大，而當(dāng)添加量較高時(0.04％)將抑制其表達(dá)。這說明如外源添加NSP酶過高，有可能抑制機體自身肝胰臟淀粉酶的分泌。 試驗六：研究了非淀粉多糖酶對奧尼羅非魚飼養(yǎng)水質(zhì)的影響。結(jié)果表明，羅非魚飼料中添加非淀粉多糖酶改善了養(yǎng)殖水體的p

8、H值，顯著降低了水中氨氮的含量，提高了水中的溶氧量。 綜上所述，飼料中添加非淀粉多糖酶可以顯著提高羅非魚和鯉魚的生產(chǎn)性能及飼料養(yǎng)分的消化率，影響了羅非魚魚體成分中蛋白質(zhì)、灰分、鈣和磷的含量，提高了羅非魚的飼養(yǎng)水質(zhì)，影響了血液生化指標(biāo)和某些代謝激素的水平。添加非淀粉多糖酶提高了肝胰臟和胃中的蛋白酶活性，提高了前、中后腸的淀粉酶活性。適量的非淀粉多糖酶對羅非魚肝胰臟淀粉酶活性和基因表達(dá)的影響不大，高劑量非淀粉多糖酶則抑制了肝胰臟淀粉