非免疫相關(guān)基因多態(tài)性與乙肝后肝硬化易感性的研究.pdf

1、背景與目的：乙肝病毒感染后有不同的臨床轉(zhuǎn)歸，其中肝硬化危害最大。乙肝后肝硬化的發(fā)生不僅與環(huán)境因素和病毒因素有關(guān)，還與個體的遺傳易感性密切相關(guān)。單核苷酸多態(tài)性（SNP）占人類可遺傳變異的90％以上，是目前詮釋疾病遺傳易感性最好的遺傳標(biāo)記。細(xì)胞因子基因多態(tài)性與乙肝后肝硬化的關(guān)系已有較多的研究報道，但與肝硬化發(fā)生過程有關(guān)的一些非免疫基因多態(tài)性很少或沒有報道，更缺乏較系統(tǒng)的研究。本項(xiàng)目將聯(lián)合檢測7個與肝硬化發(fā)生過程相關(guān)的非免疫基因多態(tài)性位點(diǎn)，探

2、討它們與乙肝后肝硬化遺傳易感性的關(guān)系。 方法：（1）研究對象：乙肝后肝硬化168例（病例組）和無癥狀乙肝病毒攜帶者155例（對照組）。（2）基因多態(tài)性分析：酚-氯仿法提取外周血基因組DNA，采用限制性片段長度多態(tài)性（PCR-RFLP）方法分析各基因位點(diǎn)的基因型。（3）計(jì)算各位點(diǎn)的基因型和等位基因頻率，采用卡方檢驗(yàn)比較它們的組間差異，并進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡吻合度檢驗(yàn)。（4）分別以總樣本和性別分層樣本進(jìn)行單因素Log

3、istic回歸分析，計(jì)算各基因型及等位基因的比數(shù)比（OR）及95％可信區(qū)間，并進(jìn)行多因素Logistic回歸分析篩選獨(dú)立的危險和保護(hù)基因型和等位基因。 結(jié)果：（1）血管緊張素原基因-20A/C多態(tài)位點(diǎn)的各基因型及等位基因頻率在肝硬化組和HBsAg攜帶組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.10），但多因素分析顯示與女性HBV感染者肝硬化風(fēng)險可能有一定關(guān)系，AA基因型和C等位基因的OR接近有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.064、0.080）。（2）

4、血管緊張素原基因-6A/G多態(tài)位點(diǎn)的基因型及等位基因頻率在肝硬化組和HBsAg攜帶組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.10），但多因素分析顯示男性HBV感染者AA是易感基因型（OR＝1.927，P＝0.047），G是保護(hù)性等位基因（OR＝0.508，P＝0.047）。（3）雌激素受體α基因-29T/C多態(tài)位點(diǎn)的各基因型和等位基因頻率在肝硬化組和HBsAg攜帶組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.10），但單因素Logistic回歸分析顯示該位點(diǎn)與

5、女性乙肝后肝硬化易感性關(guān)系密切，TC為易感基因型（OR＝3.336，P＝0.007），CC為保護(hù)基因型（OR＝0.327，P＝0.015），T為易感等位基因（OR＝3.061，P＝0.015），多因素分析仍顯示TC是女性易感基因型（OR＝3.454，P＝0.027），T是易感等位基因（OR＝3.554，P＝0.024）。（4）基質(zhì)金屬蛋白酶9基因-1562C/T位點(diǎn)的各基因型和等位基因頻率在肝硬化組和HBsAg攜帶組之間都非常接近，無統(tǒng)

6、計(jì)學(xué)意義（P>0.10），單因素和多因素分析也未顯示其與肝硬化易感性有關(guān)。（5）微粒體環(huán)氧化物水解酶基因Tyr113His位點(diǎn)的各基因型和等位基因頻率在肝硬化組和HBsAg攜帶組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.10），單因素和多因素分析也未顯示它們與乙肝后肝硬化易感性有關(guān)。（6）微粒體環(huán)氧化物水解酶基因-613C/T位點(diǎn)的各基因型和等位基因頻率在肝硬化組和HBsAg攜帶組之間差異也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.10），但該位點(diǎn)與女性乙肝后肝硬化易

7、感性可能有一定的關(guān)系，單因素分析顯示TT基因型和C等位基因的OR接近有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.089）。（7）谷胱甘肽轉(zhuǎn)硫酶M1有空白基因型和正常基因型兩種，其各基因型頻率在肝硬化組和HBsAg攜帶組之間都非常接近，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.10），多因素分析也未顯示其與乙肝后肝硬化相關(guān)。（8）多因素Logistic回歸分析顯示本研究所檢測的7個基因多態(tài)性位點(diǎn)中，AGT-6AA是獨(dú)立的男性乙肝后肝硬化易感基因型，G是獨(dú)立的男性保護(hù)性等位基因，E

8、SR1+29TC基因型和T等位基因都是獨(dú)立的女性乙肝后肝硬化的危險因子。 結(jié)論：（1）血管緊張素原基因-20A/C和-6A/G位點(diǎn)多態(tài)性與乙肝后肝硬化易感性有一定關(guān)系，其中-6A/G位點(diǎn)與男性乙肝后肝硬化易感性相關(guān)，-20A/C位點(diǎn)與女性乙肝后肝硬化易感性有一定相關(guān)性。（2）ESR1基因+29T/C位點(diǎn)基因多態(tài)性與女性乙肝后肝硬化易感性密切相關(guān)，與男性無明顯相關(guān)。（3）基質(zhì)金屬蛋白酶9基因-1562C/T位點(diǎn)與乙肝后肝硬化易感性