限進(jìn)高效液相色譜在體內(nèi)藥物分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、本研究為考察限進(jìn)高效液相色譜方法在體內(nèi)藥物分析中的普遍適用性，采用限進(jìn)填料結(jié)合單柱或柱切換系統(tǒng)，分別建立對極性的特布他林、非極性的替米沙坦和結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定的拓?fù)涮婵颠M(jìn)行血藥濃度測定的方法。主要研究內(nèi)容如下： 1、限進(jìn)填料高效液相色譜法測定人血漿中特布他林的濃度為建立限進(jìn)高效液相色譜測定人血漿中特布他林濃度的方法，直接進(jìn)特布他林血漿樣品到液相色譜系統(tǒng)測定其濃度。色譜柱為限進(jìn)填料柱(150mm×4.6mm，5μm)；柱溫：40℃；流動相

2、：甲醇-0.05M辛烷磺酸鈉溶液(含0.005M磷酸二氫鈉并用磷酸調(diào)pH至3.5)=5：95(v/v)；流速：0.8ml/min；進(jìn)樣量：20μl；熒光檢測λex280nm/λem309nm。平均回收率為94.50％，校正曲線線性范圍為1～40μg/ml(r=0.9996)。日內(nèi)和日間的平均RSD分別為2.53％，2.80％。最低檢測濃度為0.1μg/ml。本法準(zhǔn)確、簡便、快速，適用于特布他林的血藥濃度測定及其藥動學(xué)研究。 2、

3、柱切換限進(jìn)填料高效液相色譜法測定人血漿中替米沙坦的濃度為建立柱切換限進(jìn)高效液相色譜測定人血漿中替米沙坦?jié)舛鹊姆椒?，將血漿樣品直接進(jìn)樣，經(jīng)限進(jìn)填料預(yù)柱用甲醇-水=10：90(v/v)在線凈化并富集，然后洗脫切入C18分析柱用甲醇-水=63：37(v/v)進(jìn)行分離，熒光檢測λex302nm/λem365nm。校正曲線線性范圍10～2000ng/ml(r=0.9995)，回收率為95.4％～97.7％，日內(nèi)RSD為0.2％～2.6％，日間RS

4、D為2.1％～4.1％。最低檢測濃度為0.5ng/ml。本法可靠、簡便，適用于測定人血漿中替米沙坦?jié)舛燃捌渌巹訉W(xué)研究。 3、限進(jìn)高效液相色譜法同時(shí)測定人血漿中拓?fù)涮婵祪?nèi)酯型和羧酸型的濃度為建立限進(jìn)高效液相色譜同時(shí)測定人血漿中拓?fù)涮婵祪?nèi)酯型和羧酸型濃度的方法，直接進(jìn)拓?fù)涮婵笛獫{樣品到液相色譜系統(tǒng)測定其濃度。色譜柱為限進(jìn)填料柱(150mm×4.6mm,5μm)；柱溫：40℃；流動相：甲醇-0.05M磷酸鹽緩沖液(含1％三乙胺，pH6

5、.6)=13：87(v/v)；流速：1ml/min；進(jìn)樣量：20μl；熒光檢測λex390nm/λem520nm。平均回收率為94.50％，校正曲線線性范圍為20～1000ng/ml。日內(nèi)和日間RSD均不大于5％。由分析結(jié)果推得的動力學(xué)方程顯示37℃時(shí)在人血漿中拓?fù)涮婵涤蓛?nèi)酯型轉(zhuǎn)化為羧酸型為一級動力學(xué)過程，由此可進(jìn)一步外推出采樣時(shí)刻拓?fù)涮婵祪?nèi)酯型和羧酸型各自的濃度。本法準(zhǔn)確、快速，適用于拓?fù)涮婵祪煞N結(jié)構(gòu)的血藥濃度同時(shí)測定及其藥動學(xué)研究。