基于SSR，AFLP及ITS標(biāo)記在梨和胡柚系統(tǒng)演化上的研究.pdf

1、本論文采用SSR、AFLP及ITS標(biāo)記技術(shù)，開展了梨屬和胡柚的系統(tǒng)演化關(guān)系研究，主要結(jié)果如下：(1)利用SSR標(biāo)記技術(shù)對98個東方梨栽培種和品種的演化關(guān)系進(jìn)行了分析。6對SSR引物(BGA35、KU10、BGT23b、NH004a、NH011b和NH015a)共產(chǎn)生168個等位位點，平均每對引物產(chǎn)生28個等位位點且平均雜和度為0.631。不同品種間的相似系數(shù)從0.02到0.98，西方梨與東方梨之間的相似系數(shù)較低。聚類分析結(jié)果顯示，梨屬內(nèi)

2、98個種或品種(主要為東亞原產(chǎn))可分成10個組。中國砂梨、中國白梨和日本梨集中于其中的4個組，中國砂梨分散于這4個組中，呈現(xiàn)豐富的遺傳多樣性，中國白梨占3個組，而日本梨分布在1個組中。中國白梨和中國砂梨交錯聚合在一起，部分日本梨品種與中國砂梨有較高的相似系數(shù)。秋子梨品種與日本青梨聚在了一起，顯示了一定的親緣關(guān)系。西方梨形成了3個獨立的組并遠(yuǎn)離東方梨(除杜梨外)。 (2)利用AFLP標(biāo)記技術(shù)對100個東方梨栽培種和品種的演化關(guān)系進(jìn)

3、行了分析。在此，我們增加了日本高知縣山區(qū)采集的梨類型，日本古老品種和中國白梨砂梨重疊分布區(qū)域的梨類型。6對不同選擇性引物組合(EcoRI-AAG/MseI-CAT，EcoRI-ACI/MseI-CTT，EcoRI-AAC/MseI-CAG，EcoRI-AAC/MseI-CTA，EcoRI-AAC/MseI-CAA和EcoRI-AAG/MseI-CTC)成功地區(qū)分了供試樣品，獲得649條擴(kuò)增譜帶，其中多態(tài)性條帶580條，6對引物的平均多態(tài)

4、率為89％，其中以引物EcoRI-AAG/MseI-CTC的多態(tài)性最高(94％)，引物EcoRI-AAG/MseI-CAT的最低(83％)。6對引物的He值介于0.1837-0.2266之間，在中國砂梨、中國白梨和日本梨3個群中以中國砂梨的期望雜和度最高，遺傳多樣性最豐富；聚類分析結(jié)果表明，供試樣品被分成了15個組，中國砂梨分散分布于7個組，且與中國白梨相互交錯在一起，顯示中國白梨和中國砂梨較近的親緣關(guān)系。部分日本梨形成了較為獨立的一組

5、，但這些日本梨品種與來自中國浙江的砂梨品種緊密地聚在一起。同時兩個日本梨品種‘博多青’和‘金米糖’與分別來自江蘇省和江西省的兩個中國的砂梨品種‘硬枝青’和‘魁星麻殼’形成了第8組。這些結(jié)果也揭示了日本梨與中國砂梨的親緣關(guān)系較近。AFLP與SSR結(jié)果基本一致，支持將中國白梨命名成砂梨下的一個生態(tài)類型P.pyrifoliavar.sinensis(Lindley)Y.TengetK.Tanabe(Teng等，2002；Teng和Tanabe

6、，2004)以及日本梨的祖先可能起源于中國的觀點。 (3)利用ITS分子標(biāo)記技術(shù)探討了常山胡柚的起源問題。在‘常胡一號’(胡柚)的6個重組質(zhì)粒中發(fā)現(xiàn)了兩個不同的ITS序列，分別在ITS1區(qū)的第62，63，67，74，99，129，218和220位點處，而ITS2區(qū)以及5.8S區(qū)、部分的18S和26S區(qū)沒有任何不同，證實了胡柚的雜種起源。ITS1區(qū)的序列表明酸橙和柚最有可能為胡柚的親本。本研究中甜橙的ITS1序列與胡柚的ITS1序