毛大丁草多糖C（Gcp）對(duì)苯中毒小鼠的升白作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討毛大丁草多糖C(Gerberapiloselloides(Linn.)Cass.PolysaccharideC，Gcp)對(duì)苯中毒小鼠白細(xì)胞(WBC)減少的治療作用及其機(jī)制。 方法：用熱水提取、乙醇沉淀從毛大丁草根中分離得到粗毛大丁草多糖，經(jīng)純化得到多糖Gcp，用氣相色譜-質(zhì)譜(gaschromatography-massspectrography，GC-MS)法分析其化學(xué)組成。 將70只雌性昆明種小鼠按WBC水

2、平隨機(jī)分為7組，每組10只，其中六組作為苯中毒組，以2000mg/kg苯-花生油混懸液灌胃，一組作為正常對(duì)照組，灌胃生理鹽水。各組均以10ml/kg的量灌胃2周(1次/d，6d/w)。染苯2周后，從60只染苯小鼠中選取WBC降至4.0×109/L以下的50只作為苯中毒致白細(xì)胞減少小鼠模型。 按WBC水平將模型小鼠隨機(jī)分為5組，每組10只。其中設(shè)Gcp三個(gè)處理組，即Gcp低(50mg/kg)、中(100mg/kg)、高(200mg

3、/kg)3個(gè)劑量組；重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(rhG-CSF，為臨床常用升白細(xì)胞藥，以其作為陽性對(duì)照)處理組一組；模型對(duì)照組一組(生理鹽水)。另將同批未染苯小鼠10只設(shè)為正常對(duì)照組。各組均按10ml·kg-1·d-1的注射量分別腹腔注射不同藥物，連續(xù)2周。Gcp低、中、高劑量組分別腹腔注射不同濃度的Gcp液，1次/d，6d/w；rhG-CSF組腹腔注射rhG-CSF(30μg/kg)，1次/d，3d/w；模型對(duì)照組和正常對(duì)照組腹腔均注射

4、生理鹽水，1次/d，6d/w。為防治停止染苯后可能出現(xiàn)的WBC自發(fā)恢復(fù)，在治療第2周的最后3d，除正常對(duì)照組不予處理外，其余五組均同時(shí)予以灌胃染苯，方法同復(fù)模階段。 實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，頸椎脫臼處死動(dòng)物，進(jìn)行血常規(guī)(白細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、血小板數(shù)和血紅蛋白含量)、臟器指數(shù)(脾臟、胸腺、心臟、肝臟、肺臟及腎臟)、臟器病理(脾臟、胸腺、肝臟及腎臟)、脾淋巴細(xì)胞增殖功能、骨髓象、骨髓細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)、骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率、骨髓細(xì)胞線粒體DNA(m

5、itochondriaDNA，mtDNA)D-環(huán)(Displancementloop,D-Loop)區(qū)突變等檢測(cè)。 結(jié)果：Gcp分子量約為7.5kD，單糖組成與比例為：果糖：木糖：葡萄糖=24∶1∶4。Gcp200mg/kg可顯著升高苯中毒引起的小鼠白細(xì)胞減少(P＜0.01)；并對(duì)苯中毒所致的小鼠脾指數(shù)下降、肝損傷(肝細(xì)胞壞死)及骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核發(fā)生率升高均有一定的抑制作用。Gcp100mg/kg可促進(jìn)苯中毒小鼠脾、胸腺指數(shù)

6、回升。Gcp對(duì)苯中毒小鼠骨髓粒細(xì)胞變性壞死有一定的改善作用，并可增加骨髓粒細(xì)胞特異性顆粒。Gcp50mg/kg對(duì)苯的各種毒性作用無明顯改善作用。 苯可引起小鼠骨髓細(xì)胞mtDNAD-Loop區(qū)發(fā)生多種類型的突變，包括點(diǎn)突變、單堿基插入和缺失，Gcp對(duì)苯誘導(dǎo)的突變無明顯改善作用。 結(jié)論：苯2000mg/kg灌胃小鼠2周后可使WBC降至4.0×109/L以下而復(fù)制出苯中毒白細(xì)胞減少小鼠模型，苯可引起mtDNAD-Loop區(qū)發(fā)生