不同日齡仔豬腸道中TWEAK-Fn14表達(dá)規(guī)律研究.pdf

1、腫瘤壞死因子樣凋亡微弱誘導(dǎo)劑(TWEAK)通過與其受體成纖維母細(xì)胞因子誘導(dǎo)基因14(Fn14)結(jié)合在維持胃腸道免疫平衡及介導(dǎo)機(jī)體腸道炎癥反應(yīng)中發(fā)揮著重要作用。多種病因引起的仔豬腹瀉主要以腸道炎癥病變?yōu)樘卣?，然而對仔豬胃腸道中TWEAK/Fn14分布表達(dá)規(guī)律及其在腸道局部免疫調(diào)控中生物學(xué)功能了解甚少。本研究旨在檢測不同日齡健康及LPS刺激仔豬腸道內(nèi)TWEAK及Fn14分布及表達(dá)水平，為探索TWEAK-Fn14通路在仔豬正常生理?xiàng)l件下的免疫

2、動(dòng)態(tài)穩(wěn)態(tài)維持及炎癥狀態(tài)下免疫功能轉(zhuǎn)換中調(diào)控作用奠定基礎(chǔ)。本實(shí)驗(yàn)分別采集0d、7d、33d、55 d健康以及LPS刺激仔豬的小腸、回腸、直腸、結(jié)腸組織，通過qRT-PCR及Western Blot方法檢測TWEAK、Fn14以及腸道緊密連接蛋白Occludin的分布表達(dá)規(guī)律。獲得的研究結(jié)果如下:
　　1.熒光定量RT-PCR結(jié)果顯示，不同日齡健康仔豬各腸道中均可檢測到TWEAK與Fn14 mRNA，其中TWEAK mRNA表達(dá)水平在

3、7d時(shí)迅速增強(qiáng)并保持高水平，F(xiàn)n14mRNA表達(dá)水平在7～55 d健康仔豬各腸道中表達(dá)水平均較0d略微增強(qiáng);55d仔豬經(jīng)LPS刺激后，與同日齡正常對照組比較，各腸道中TWEAK mRNA表達(dá)量均顯著降低，而Fn14 mRNA表達(dá)量均顯著增強(qiáng)。
　　2.通過Western Blot檢測發(fā)現(xiàn)，健康仔豬中TWEAK表達(dá)水平在0d各腸道組織中均較低，在7～55 d時(shí)小腸、回腸和結(jié)腸中表達(dá)水平迅速增強(qiáng)并維持高水平，直腸組織中7d時(shí)表達(dá)水平最

4、高，隨后快速減低。各檢測日齡段健康仔豬各腸道中Fn14表達(dá)水平均較微弱，其中0d時(shí)表達(dá)量最低。另外，小腸中Occludin表達(dá)量在0～7 d時(shí)最低，隨后不斷升高，到55 d時(shí)達(dá)到最高水平;回腸組織中Occludin表達(dá)水平在各日齡段均較高。在結(jié)腸、直腸組織中，Occludin在0d表達(dá)水平最高，隨后均呈現(xiàn)下降趨勢。經(jīng)LPS作用處理后，TWEAK與Occludin表達(dá)量均較正常對照組顯著降低，而Fn14表達(dá)量則顯著升高。
　　綜上所