吲哚醌抑制腎癌細胞生長的蛋白質組學研究.pdf

1、目的：驗證2，3吲哚醌對腎癌786-0細胞株有抗增殖、誘凋亡的作用；應用SELDI-TOF-MS技術初步探討2，3吲哚醌對腎癌786一0細胞株抗增殖、誘導凋亡作用的分子機制；旨在尋找抗腎癌的靶細胞藥物及位點。 材料和方法：實驗所用腎癌細胞為腎癌786-0細胞株。1.增殖抑制實驗：本實驗采用MTT比色法及普通倒置顯微鏡下觀察法檢測細胞增殖活性，以濃度100～800μmol/L2，3-吲哚醌作用腎癌786-0細胞株24～72h后，觀

2、察藥物對腎癌細胞增殖的影響。2.細胞凋亡實驗：本實驗采用Hoechst33258熒光染色法觀察藥物作用后腎癌786-0細胞凋亡的形態(tài)學改變。3.差異蛋白實驗：實驗組和對照組分別提取細胞裂解液，蛋白定量后采用WCX2芯片分析，應用SELDI-TOF-MS技術檢測藥物作用前后蛋白質表達的差異。 結果：MTT比色法證實，2，3-吲哚醌能顯著抑制腎癌細胞株786-0的體外增殖，其中在200-800μMol/L幾呈時間與劑量依賴性；普通倒

3、置顯微鏡下觀察顯示藥物作用后腎癌細胞株786-0細胞生長緩慢，未見明顯增殖；Hoechst33258熒光染色證實，經(jīng)2，3-吲哚醌作用后的腎癌細胞株786-0細胞核周圍出現(xiàn)凋亡小體；應用SELDI-TOF-MS技術檢測發(fā)現(xiàn)，WCX2芯片共捕獲56個蛋白峰，其中藥物作用組與對照組之間比較有4個明顯的差異蛋白峰，其中在藥物組有3個特異性高表達峰，1個特異性低表達峰。對不同濃度藥物作用組之間比較，未發(fā)現(xiàn)明顯的差異蛋白峰，僅發(fā)現(xiàn)蛋白峰強度有差別