腎母細(xì)胞瘤螺旋CT征象與CD34、VEGF、MMP-7表達(dá)間關(guān)系的研究.pdf

1、背景與目的：腎母細(xì)胞瘤(Nephroblastoma)又稱Wilms'瘤或腎胚胎瘤，是小兒腹部最常見的惡性腫瘤之一，占小兒實(shí)體瘤的8％，占小兒腎臟腫瘤的80％以上。腎母細(xì)胞瘤生長迅速，惡性程度高，發(fā)生轉(zhuǎn)移早，可轉(zhuǎn)移至腎靜脈，亦可轉(zhuǎn)移到肺、肝及淋巴結(jié)等，瘤細(xì)胞侵犯及轉(zhuǎn)移是影響其療效而致患者死亡的主要原因之一。目前，影像學(xué)的發(fā)展為其術(shù)前診斷和分期提供了有力的幫助。用于腎母細(xì)胞瘤的檢查技術(shù)包括超聲、X線(腹部X線平片、CT、靜脈腎盂造影、下腔

2、靜脈造影和腎動(dòng)脈造影)、MRI等，與其它幾項(xiàng)檢查技術(shù)相比，CT尤其是螺旋CT(SpiralCT,SCT)診斷價(jià)值較高，它不但能確定病變的位置、形態(tài)還能準(zhǔn)確測量其大小，并能顯示包膜是否完整、鄰近組織器官的浸潤程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移情況，對(duì)治療方案的選擇和判斷預(yù)后起重要作用，是腎母細(xì)胞瘤目前主要的影像學(xué)檢查方法。 腎母細(xì)胞瘤的發(fā)生是多因素、多基因參與的過程，其浸潤和轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜的生物學(xué)行為，也是惡性腫瘤的主要生物學(xué)特征之一

3、，是影響預(yù)后的一個(gè)重要因素。隨著對(duì)腫瘤基因水平的深入研究，發(fā)現(xiàn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移與血管生成及細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrix，ECM)的降解密切相關(guān)。其中血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶家族(matrixmetalloporteinases，MMPs)是目前研究腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的熱點(diǎn)之一。VEGF是一高度特異的血管內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂原，具

4、有促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、促進(jìn)血管生成、增加血管通透性以及血管維持功能，被認(rèn)為是作用最強(qiáng)、特異性最高的調(diào)控血管生成因子。VEGF與腫瘤血管生成關(guān)系密切，在多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲和轉(zhuǎn)移中起重要作用，對(duì)判斷腫瘤預(yù)后有重要意義。CD34是標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞的敏感物質(zhì)，可用來檢測微血管密度(MircovesselDensity,MVD)，評(píng)價(jià)腫瘤的血管生成。MMPs是降解細(xì)胞外基質(zhì)的主要酶類之一，其中基質(zhì)金屬蛋白酶-7(MMP-7，Matril

5、ysin)是降解型膠原最主要的酶，可以降解細(xì)胞外基質(zhì)和血管基底膜，從而破壞了機(jī)體防御腫瘤浸潤與轉(zhuǎn)移的自然屏障，增加了癌細(xì)胞的侵襲性，促進(jìn)了腫瘤的浸潤和轉(zhuǎn)移。MMP-7具有廣泛的底物特異性和強(qiáng)大的基質(zhì)降解能力，從而在腫瘤血管生成的過程中促進(jìn)了內(nèi)皮細(xì)胞的遷移，大量研究發(fā)現(xiàn)MMP-7可以降解細(xì)胞外基質(zhì)和刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞DNA合成來促進(jìn)血管生成。VEGF、MMP-7在腎母細(xì)胞瘤的表達(dá)具有協(xié)同作用，共同參與了腎母細(xì)胞瘤的惡性進(jìn)展。VEGF、MMP

6、-7、MVD均與腎母細(xì)胞瘤的分期、腎包膜侵犯和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。 目前，SCT在腎母細(xì)胞瘤中的診斷價(jià)值和浸潤、轉(zhuǎn)移相關(guān)基因在腎母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及病理意義研究較多。但是小兒腎母細(xì)胞瘤的SCT檢查與分子生物學(xué)結(jié)合起來的研究尚未見報(bào)道。本研究采用免疫組化(SP法)檢測VEGF、MMP-7在腎母細(xì)胞瘤中的表達(dá)，探討其在腎母細(xì)胞瘤浸潤和轉(zhuǎn)移中所起的作用，并將其與術(shù)前的SCT征象結(jié)合起來研究，旨在評(píng)價(jià)腎母細(xì)胞瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移SCT征象與病理

7、學(xué)、分子生物學(xué)特性間的關(guān)系，依據(jù)其影像學(xué)表現(xiàn)特點(diǎn)來推測腎母細(xì)胞瘤的惡性程度，為臨床治療方案的選擇及預(yù)后的評(píng)估提供影像學(xué)依據(jù)。 材料與方法：本研究收集了術(shù)前行SCT檢查，術(shù)后經(jīng)病理證實(shí)的腎母細(xì)胞瘤標(biāo)本38例，所有標(biāo)本均經(jīng)10％福爾馬林液固定，石蠟包埋。38例腎母細(xì)胞瘤標(biāo)本中男23例，女15例，年齡5月-10歲，平均2.51±1.04歲，其中SCT征象和手術(shù)病理診斷鄰近結(jié)構(gòu)侵犯分別為13例和11例，SCT征象和手術(shù)病理診斷淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移

8、分別為12例和11例，3例肺部轉(zhuǎn)移?；純盒g(shù)前均未行化療及放療。腫瘤HE染色由兩位病理科醫(yī)師明確診斷并作組織病理分型，按美國腎母細(xì)胞瘤研究組(Nationalwilms'TumorStudyGroup，NWTSG)的標(biāo)準(zhǔn)分為兩型：組織結(jié)構(gòu)良好型(FavorableHistology,FH型)31例和組織結(jié)構(gòu)不良型(UnfavorableHistology,UH型)7例。根據(jù)術(shù)中情況和病理特點(diǎn)按美國腎母細(xì)胞瘤研究組(NWTS-5)標(biāo)準(zhǔn)判定臨

9、床病理分期，其中Ⅰ期14例，Ⅱ期9例，Ⅲ期12例，Ⅳ期3例。SCT檢查采用美國GEHispeedAdvantageRP22SCT機(jī)，全部病例行平掃加增強(qiáng)掃描。SCT檢查按上述分期標(biāo)準(zhǔn)分期結(jié)果為Ⅰ期13例，Ⅱ期11例，Ⅲ期11例，Ⅳ期3例。采用免疫組織化學(xué)(SP法)染色檢測38例腎母細(xì)胞瘤石蠟切片中VEGF、MMP-7、CD34表達(dá)情況。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：所有資料采用SPSS12.0軟件處理，以a=0.05為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。 結(jié)果：1.

10、38例腎母細(xì)胞瘤SCT雙期增強(qiáng)掃描的檢查率為100％，定性診斷率為100％，是腎母細(xì)胞瘤術(shù)前檢查的有力工具。 2.SCT征象上有、無鄰近結(jié)構(gòu)侵犯組間，MVD值分別為(46.86±6.87)條/視野和(26.85±8.59)條/視野，兩者比較差異有顯著性(P＜0.05)，VEGF的陽性表達(dá)分別為12例和10例，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，MMP-7的表達(dá)密度分別為(63.13±9.27)％和(33.64±5.60)％

11、，兩者比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 3.SCT征象上有、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組間，MVD值平均分別為(47.52±6.73)條/視野和(27.31±8.74)條/視野，兩者比較差異有顯著性(P＜0.05)，VEGF的陽性表達(dá)分別各為11例，兩者比較差異有顯著性(P＜0.05)，MMP-7的陽性表達(dá)密度分別為(64.38±8.44)％和(34.19±6.17)％，兩者比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 4.在腎母

12、細(xì)胞瘤SCT分期中高分期(Ⅲ+Ⅳ期)14例和低分期(Ⅰ+Ⅱ期)24例中MVD值分別為(46.21±7.03)條/視野和(26.39±8.46)條/視野，兩者比較差異有顯著性(P＜0.05)，VEGF的陽性表達(dá)分別為12例和10例，兩者比較差異有顯著性(P＜0.05)，MMP-7的表達(dá)密度分別為(61.93±9.97)％和(33.11±5.04)％，兩者比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，MVD值及VEGF、MMP-7的陽性表達(dá)均與臨

13、床分期有關(guān)。 5.腎母細(xì)胞瘤組織病理分型中FH型31例和UH型7例間VEGF的陽性表達(dá)分別為17例和5例，兩者比較無明顯相關(guān)性(P＞0.05)，MVD值分別為(29.65±9.68)條/視野和(51.58±5.86)條/視野，兩者比較差異有顯著性(P＜0.05)，MMP-7的表達(dá)密度分別為(37.74±10.22)％和(70.26±2.63)％，兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 6.VEGF表達(dá)陽性組22例與陰

14、性組16例間，MMP-7的平均表達(dá)密度分別為(59.51±11.40)％和(32.25±4.31)％，兩者比較差異顯著(P＜0.05)，MVD值分別為(41.88±8.21)條/視野和(22.44±7.51)條/視野，兩者比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，MMP-7與MVD進(jìn)行直線相關(guān)分析，兩者顯著相關(guān)(r=0.917，P＜0.001) 結(jié)論：1.SCT雙期增強(qiáng)掃描是腎母細(xì)胞瘤治療前一項(xiàng)頗有價(jià)值的診斷技術(shù)，能較準(zhǔn)確反映其病理學(xué)

15、基礎(chǔ)。 2.SCT征象上鄰近結(jié)構(gòu)侵犯及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和SCT分期中高分期中的MVD的值及VEGF的表達(dá)明顯增多，VEGF的表達(dá)與腎母細(xì)胞瘤的轉(zhuǎn)移有關(guān)，血管生成可能是腎母細(xì)胞瘤惡性進(jìn)展的重要促進(jìn)因素，MVD的多少在一定程度上可以反映腎母細(xì)胞瘤的惡性程度。 3.SCT征象上鄰近結(jié)構(gòu)侵犯及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和SCT分期中高分期中的MMP-7的表達(dá)明顯增多，MMP-7的表達(dá)量與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。 4.UH型和FH型腎母細(xì)胞瘤

16、血管生成活性不盡相同，UH型腎母細(xì)胞瘤高度惡性行為可能與其豐富血運(yùn)有關(guān)。 5.腎母細(xì)胞瘤組織中VEGF與MMP-7的表達(dá)密切相關(guān)，提示二者之間存在某種調(diào)控關(guān)系，二者協(xié)同參與了腎母細(xì)胞瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移過程。聯(lián)合檢測兩項(xiàng)指標(biāo)有助于進(jìn)一步了解腎母細(xì)胞瘤的浸潤轉(zhuǎn)移機(jī)制，對(duì)預(yù)測腎母細(xì)胞瘤的轉(zhuǎn)移、判斷其預(yù)后、選擇治療方案，同時(shí)為抗微血管生成治療腎母細(xì)胞瘤提供理論依據(jù)。 6.腎母細(xì)胞瘤的部分SCT征象與MVD值及VEGF、MMP-7的表