主動(dòng)外排泵AdeFGH與鮑曼不動(dòng)桿菌多重耐藥的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：了解60株鮑曼不動(dòng)桿菌臨床分離株的臨床分布及耐藥情況，并探討主動(dòng)外排系統(tǒng)基因adeF、adeG、adeH在鮑曼不動(dòng)桿菌中的分布及其mRNA表達(dá)水平與鮑曼不動(dòng)桿菌多重耐藥性的關(guān)系，從而為指導(dǎo)臨床合理使用抗生素、減少耐藥菌株的產(chǎn)生和傳播以及為新型抗菌藥物的研發(fā)提供理論依據(jù)。
　　方法：收集不同科室的痰標(biāo)本、傷口分泌物標(biāo)本和其他類型標(biāo)本，采用平板分離技術(shù)進(jìn)行鮑曼不動(dòng)桿菌的分離，經(jīng)BD CRYSTAL細(xì)菌鑒定系統(tǒng)進(jìn)行菌種確定，采用法

2、國(guó)生物梅里埃ATB藥敏板對(duì)臨床分離的60株鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行20種藥物的藥敏檢測(cè)，然后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；在GenBank上查找鮑曼不動(dòng)桿菌的adeF、adeG、adeH基因序列，應(yīng)用 Lasergene8.1.3軟件設(shè)計(jì)引物，運(yùn)用聚合酶鏈擴(kuò)增（Polymerase chain reaction, PCR）技術(shù)檢測(cè)外排泵基因adeF、adeG、adeH在收集到的鮑曼不動(dòng)桿菌臨床株中的分布情況，運(yùn)用熒光定量 PCR（Real Time PCR,R

3、T-PCR)技術(shù)檢測(cè)收集到的鮑曼不動(dòng)桿菌臨床株中外排泵基因 adeF、adeG、adeH的mRNA表達(dá)水平，綜合分析其與鮑曼不動(dòng)桿菌多重耐藥性的關(guān)系。
　　結(jié)果：
　　1、60株鮑曼不動(dòng)桿菌標(biāo)本主要來(lái)自ICU（占46.7％），神經(jīng)外科（占15%）等臨床科室；標(biāo)本分布主要為痰標(biāo)本（占78.3%），其次傷口分泌物標(biāo)本（占11.7%），其它類型標(biāo)本占10%；60株鮑曼不動(dòng)桿菌根據(jù)藥敏結(jié)果分為三組：A組（全耐藥）24株（40%），B

4、組（氨基糖苷類和復(fù)方新諾明敏感，其他抗生素耐藥）26株（43.3%），C組（耐阿莫西林和一、二代頭孢菌素類抗菌藥物，其他抗生素敏感）10株（16.7%）。
　　2、泛耐藥株（A組）和多重耐藥株（B組）中均有adeF、adeG、adeH三個(gè)基因；相對(duì)敏感株（C組）中只有adeF、adeG、adeH基因中的一個(gè)或兩個(gè)，其中，均有adeG基因，存在adeH基因的有3株，存在adeF基因的有2株。該組未檢出adeF、adeG、adeH三個(gè)

5、基因同時(shí)存在的菌株，說(shuō)明adeF、adeG、adeH三個(gè)基因同時(shí)存在可能與鮑曼不動(dòng)桿菌多重耐藥有關(guān)。
　　3、adeF和adeG基因的mRNA的表達(dá)水平在抗菌譜A、B、C三組之間無(wú)明顯差異；adeH基因的mRNA表達(dá)水平在A組和B組之間無(wú)明顯差異(p>0.05），在A組和C組以及B組和C組之間有顯著差異(p<0.05），但C組有部分菌株的adeH基因mRNA表達(dá)水平較高，說(shuō)明鮑曼不動(dòng)桿菌外排泵AdeFGH發(fā)揮外排作用可能需要ade