雌激素對青春期大鼠Sertoli細(xì)胞及血-睪屏障的影響.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)旨在通過體內(nèi)、體外兩種途徑給予青春期大鼠外源性雌激素，初步探討在Sertoli細(xì)胞分化和成熟階段，雌激素對Sertoli細(xì)胞FasL表達(dá)以及血－睪屏障的影響，進(jìn)一步討論影響血－睪屏障的相關(guān)因素及其可能機(jī)制。 方法：（1）Sertoli細(xì)胞FasL的表達(dá)：①在培養(yǎng)液中加入雌二醇（濃度4×10-6M），分別在Sertoli細(xì)胞培養(yǎng)24小時、48小時，用間接免疫熒光方法檢測Sertoli細(xì)胞 FasL表達(dá)的變化；②新生SD

2、大鼠（出生=第0天），自出生第二天始隔日皮下注射二乙烯雌酚（DES），濃度10 mｇ/20mｌ，至第十二天為止，與母鼠共同喂養(yǎng)至第18天和第25天兩個時間點(diǎn)取材。應(yīng)用間接免疫熒光方法檢測Sertoli細(xì)胞 FasL表達(dá)的變化。（2）新生SD大鼠自出生第二天始隔日皮下注射DES，與母鼠共同喂養(yǎng)至第18天和第25天取出雙側(cè)睪丸，切成1mm3小塊，置入3％ 硝酸鑭-戊二醛-二甲砷酸鈉緩沖液中前固定，利用重金屬鑭不能穿越正常血－睪屏障的特點(diǎn)，運(yùn)

3、用睪丸組織硝酸鑭塊染法在電鏡下觀察血－睪屏障結(jié)構(gòu)的變化。（3）新生SD大鼠自出生第二天始隔日皮下注射DES，與母鼠共同喂養(yǎng)至第18天和第25天兩個時間點(diǎn)心臟取血，ELISA方法檢測血液中TNFα濃度的變化。 結(jié)果：給予外源性雌激素后使：（1）Sertoli細(xì)胞FasL表達(dá)增強(qiáng)，并出現(xiàn)FasL分布區(qū)域的改變。（2）在18天實(shí)驗(yàn)組，電鏡下顯示鑭大量透過血－睪屏障，到達(dá)生精上皮全層。（3）血液中TNFα濃度降低。 結(jié)論：（1