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文檔簡介
1、本文從以下幾方面進行了詳細闡述。
第一部分攜抗P-selectin靶向超聲造影劑的制備及體外尋靶實驗研究。
目的:制備攜抗P-selectin靶向超聲造影劑,并研究其體外尋靶能力。
方法:采用“生物素-親和素”橋接法制備攜抗P-selectin靶向超聲造影劑,檢測其基本特性。應用不同劑量重組人白介素-4(rhIL-4)和組胺聯(lián)合刺激人臍靜脈血管內皮細胞(HUVECs)表達P-selectin,用免疫熒光檢測
2、P-selectin的表達水平并探尋rhIL-4最適刺激劑量。靶向超聲造影劑、同型對照超聲造影劑和空白超聲造影劑分別與經最適劑量rhIL-4和組胺聯(lián)合刺激的HUVECs及未作處理的HUVECs進行體外尋靶實驗。
結果:成功制備攜抗P-selectin靶向超聲造影劑,平均粒徑為(2.24±0.71)μm,平均Zeta電位為(-2.75±0.84)mV,濃度為(3.0±0.3)×109個/ml,抗體結合率高達99.80%;免疫熒光
3、檢測結果顯示rhIL-4和組胺能成功刺激HUVECs表達P-selectin,并探尋出rhIL-4最適刺激劑量;體外尋靶實驗顯示靶向超聲造影劑能較好地粘附在經最適劑量rhIL-4和組胺聯(lián)合刺激的HUVECs表面,與其它組比較差異有統(tǒng)計學意義。
結論:采用“生物素-親和素”橋接法成功制備攜抗P-selectin靶向超聲造影劑,該造影劑在體外能有效地粘附在經rhIL-4和組胺聯(lián)合刺激的HUVECs表面。
第二部分攜抗P-
4、selectin靶向超聲造影劑體內超聲分子成像研究。
目的:制備攜抗P-selectin靶向超聲造影劑,并研究其評價心肌缺血再灌注損傷的超聲分子成像效果。
方法:采用“生物素-親和素”橋接法制備攜抗P-selectin靶向超聲造影劑,建立犬心肌缺血再灌注模型,隨機先后(間隔30 min)注入攜抗P-selectin靶向超聲造影劑(MBp)和空白超聲造影劑(MBc),注入10 min后,行心肌聲學造影檢查,采圖、存盤。
5、應用DFY型超聲圖像定量分析診斷儀中的彩色編碼技術對存儲的圖像進行脫機處理,觀察MBp體內超聲分子成像效果。
結果:成功制備攜抗P-selectin靶向超聲造影劑及建立犬心肌缺血再灌注模型;彩色編碼圖像顯示:MBp行心肌聲學造影可于缺血再灌注區(qū)心肌見顯著造影增強,MBc于缺血再灌注區(qū)心肌造影無明顯增強。
結論:應用攜抗P-selectin靶向超聲造影劑,于體內行心肌聲學造影檢查能準確檢測在灌注治療后的心肌缺血再灌注損
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