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1、卵母細(xì)胞老化會(huì)造成卵母細(xì)胞質(zhì)量下降,影響早期胚胎發(fā)育以及出生后代的健康。老化的卵母細(xì)胞最顯著的特征是孤雌激活率上升、MPF活性下降,皮質(zhì)顆粒排出異常,透明帶硬化,受精率下降,易引起基因突變,最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡或壞死,妊娠失敗。
當(dāng)卵母細(xì)胞發(fā)生老化時(shí),細(xì)胞內(nèi)代謝異常,引起線粒體活性改變,導(dǎo)致電子呼吸鏈傳遞電子過(guò)程中,一些電子發(fā)生“逃逸”,并與細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)相結(jié)合,使細(xì)胞內(nèi)氧自由基積累。卵母細(xì)胞可以利用谷胱甘肽將其清除,但隨著老化的
2、進(jìn)行,GSH逐漸消耗,導(dǎo)致胞內(nèi)ROS水平上升,從而引起細(xì)胞凋亡,影響卵母細(xì)胞質(zhì)量。
現(xiàn)有研究表明,N-乙酰-L半胱氨酸作為谷胱甘肽合成前體、具有抗氧化能力,可以有效清除氧自由基。為探究NAC在排卵后小鼠卵母細(xì)胞老化過(guò)程中的作用及相關(guān)機(jī)制,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)添加有不同濃度NAC的培養(yǎng)液,對(duì)卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)12小時(shí),以新鮮卵母細(xì)胞為對(duì)照,檢測(cè)并對(duì)比多項(xiàng)影響卵母細(xì)胞質(zhì)量的重要指標(biāo),如孤雌激活率、ROS水平、線粒體活性及排布、透明帶硬化程度、
3、體外受精后的受精率與早期胚胎發(fā)育狀況等,以探宄NAC對(duì)卵母細(xì)胞老化是否有延緩作用及相關(guān)分子機(jī)制,得出結(jié)果如下:
(1)添加NAC,可顯著降低排卵后老化卵母細(xì)胞對(duì)孤雌活化的敏感性,并提高其MPF活性,延緩卵母細(xì)胞老化。而添加濃度為2 mM以上(包括2 mM)的NAC具有較顯著的延緩作用;
(2)在卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)過(guò)程中,添加2 mM NAC促進(jìn)卵母細(xì)胞內(nèi)谷胱甘肽合成,維持適宜的GSH/GSSG比例,以提高卵母細(xì)胞的氧化
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