炎癥性關(guān)節(jié)病外周血Th17細胞檢測及意義.pdf

1、引言:炎癥性關(guān)節(jié)病包括類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid Arthritis,RA)、強直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis,AS)和感染性關(guān)節(jié)炎。RA是一種累及周圍關(guān)節(jié)為主的全身性、炎癥性自身免疫病,可累及心、肺、腎、血管、血液、神經(jīng)及眼等組織或器官。RA的發(fā)病機制尚未完全明確,目前認為可能是攜帶RA易感基因者被某種病原體感染后導(dǎo)致機體免疫系統(tǒng)紊亂,T細胞介導(dǎo)的免疫異常是其主要的發(fā)病機制,尤其是CD4+T細胞起著關(guān)

2、鍵作用,CD4+T細胞參與了關(guān)節(jié)炎癥的激發(fā)和延續(xù)。AS的臨床特征是中軸關(guān)節(jié)的慢性炎癥,其發(fā)病機制不明,可能是一種遺傳因素(HLA-B27)占主導(dǎo)的多基因疾病?？乖岢始毎砻鍴LA-B27分子將處理的抗原多肽提呈給免疫活性T細胞后啟動了發(fā)病過程,其中T細胞免疫功能異常在其發(fā)病機制中起著重要作用。Th17細胞是近年新發(fā)現(xiàn)的一種輔助性T細胞,其各種特性與Th1和Th2細胞不同,產(chǎn)生的細胞因子包括IL-17、IL-21和IL-22等,可能在炎

3、癥性關(guān)節(jié)病(RA、AS)的致病機制中發(fā)揮重要作用。
　　 目的:檢測炎癥性關(guān)節(jié)病(RA、AS)外周血Th17細胞比例,及CD4+T細胞IL-17蛋白表達和IL-17、RORγtmRNA水平,并初步探討其臨床意義。
　　 方法：分離炎癥性關(guān)節(jié)病(RA、AS)患者和健康人外周血單個核細胞(PBMC),免疫磁珠分選CD4+T細胞,經(jīng)PMA/Ion刺激,固定/透膜劑處理,然后進行細胞內(nèi)染色,流式細胞術(shù)(FCM)檢測CD4+T細胞

4、IL-17+、IFN-γ+、IL-6+水平。應(yīng)用實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測IL-17、RORγtmRNA水平。應(yīng)用Pearson相關(guān)性檢驗分析IL-17與IFN-γ、IL-6、ESR和CRP之間的相關(guān)性。分組:①健康人對照組；②病情穩(wěn)定組；③病情活動組。
　　 結(jié)果：(1)免疫磁珠陰選CD4+T細胞純度達90％以上。(2)RA和AS病情活動組IL-17表達水平顯著高于病情穩(wěn)定組(P<0.01),病情活動組

5、和病情穩(wěn)定組又顯著高于健康人對照組(P<0.01)。用A-CD3、A-CD28、IL-23聯(lián)合刺激后,RA患者CD4+T細胞IL-17表達水平較無刺激組顯著增加(P<0.05),而AS患者無明顯增加(P>0.05)。(3)RA和AS患者CD4+T細胞IL-17、RORγtmRNA水平病情活動組較穩(wěn)定組和對照組顯著增高(P<0.01)。用A-CD3、A-CD28、IL-23刺激后,RA和AS患者CD4+T細胞IL-17、RORγtmRNA

6、水平顯著高于未刺激組(P<0.05),刺激12h組又高于刺激24h組(P<0.01)(4)RA和AS患者CD4+T細胞IL-17蛋白水平與IFN-γ、IL-6無顯著相關(guān),與ESR、C反應(yīng)蛋白(CRP)也未見明顯相關(guān)性(P>0.05)。
　　 結(jié)論：(1)炎癥性關(guān)節(jié)病(RA、AS)患者外周血CD4+T細胞中存在異常增高的Th17細胞,異常增高的Th17細胞、以及Th17/Th1/Th2三者的比例失調(diào)可能參與了RA和AS的發(fā)病過程。