類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血髓樣抑制細(xì)胞檢測及其與Th17細(xì)胞的相關(guān)性研究.pdf

1、研究目的:
　　 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoidarthritis，RA)是一種以關(guān)節(jié)慢性炎癥為主的自身免疫性疾病，T輔助細(xì)胞17(Thelpercells，Th17)在其病理進(jìn)程中起著重要作用。近來，髓樣抑制細(xì)胞(myeloid-derivedsuppressorcells，MDSCs)因其具有重要的免疫抑制作用，成為自身免疫性疾病發(fā)病機(jī)制研究的熱點(diǎn)。本研究的主要目的是分析RA患者外周血中MDSCs的變化及其與Th17細(xì)胞

2、的關(guān)系，初步明確MDSCs在RA細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)功能中的作用。
　　 研究方法:
　　 (1)采用流式細(xì)胞術(shù)(flowcytometry,FCM)檢測健康對(duì)照組(healthycontrol，HC)及RA患者外周血中MDSCs和Th17細(xì)胞的比例。
　　 (2)利用實(shí)時(shí)定量PCR(real-timePCR，RT-qPCR)檢測健康對(duì)照組及RA患者外周血中MDSCs產(chǎn)物精氨酸酶1（arginase-1，Arg-1）和誘

3、導(dǎo)型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase，iNOS)及Th17細(xì)胞相關(guān)因子白介素6(interleukin-6，IL-6)、白介素17A(interleukin-17A，IL-17A)、腫瘤壞死因子α(tumornecrosisfactor-α，TNF-α)和其特異性轉(zhuǎn)錄因子維甲酸相關(guān)孤兒受體γt(retinoidrelatedorphanreceptorgammat，RORγt)的mRNA表達(dá)。

4、>　　 (3)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme-linkedimmunosorbentassays，ELISA)檢測健康對(duì)照組及RA患者血漿中IL-17A、IL-6、ZNF-α及Arg-1濃度。
　　 研究結(jié)果:
　　 (1)與健康對(duì)照組相比，RA患者外周血中的MDSCs和Th17細(xì)胞比例均顯著升高(P＜0.05)。
　　 (2)RA患者外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)中IL-17A、IL-6、TNF-α及RO

5、Rγt的mRNA表達(dá)明顯高于健康對(duì)照組（P＜0.05），RA患者外周血白細(xì)胞中Arg-1的mRNA表達(dá)量明顯高于健康對(duì)照組（P＞0.05）。而iNOS的mRNA表達(dá)量與健康對(duì)照組無顯著差別（P＞0.05）。
　　 (3)與健康對(duì)照組相比，RA患者血漿中IL-17A、IL-6、TNF-α及Arg-1的濃度均顯著升高(P＜0.05)。
　　 (4)經(jīng)相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)RA患者外周血中MDSCs比例與Th17細(xì)胞比例、血漿中Ar

6、g-1濃度以及白細(xì)胞中Arg-1mRNA相對(duì)表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.48，P=0.01;r=-0.5，P=0.008;r=-0.55，P=-0.003)。另外，RA患者外周血中MDSCs比例也與血漿TNF-α濃度呈負(fù)相關(guān)(r=-0.55，P=0.003)。而在正常人中未發(fā)現(xiàn)以上相關(guān)性。
　　 結(jié)論:
　　 RA患者外周血中MDSCs和Th17細(xì)胞之間可能存在動(dòng)態(tài)的相互作用，這種動(dòng)態(tài)的相互作用可能在RA的病程進(jìn)展中發(fā)揮重