引物原位標(biāo)記在染色體病診斷中的應(yīng)用.pdf

1、目的：建立臨床實(shí)用的快速檢出染色體病新的分子細(xì)胞遺傳學(xué)方法，為指導(dǎo)優(yōu)生優(yōu)育和產(chǎn)前診斷工作提供可運(yùn)行的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)手段。 方法：應(yīng)用21號(hào)染色體特異性引物對(duì)30例智力低下兒童外周血淋巴細(xì)胞標(biāo)本進(jìn)行引物原位標(biāo)記(primedinsitulabeling，PRINS)，同時(shí)與傳統(tǒng)細(xì)胞遺傳學(xué)核型分析技術(shù)進(jìn)行比較。利用Tyramine信號(hào)放大檢測(cè)方法，對(duì)4號(hào)染色體長(zhǎng)臂亞末端進(jìn)行PRINS標(biāo)記檢測(cè)；結(jié)合Tyramine信號(hào)放大系統(tǒng)及在同一染色體

2、亞末端設(shè)計(jì)多組引物的方法，對(duì)29例智力低下兒童外周血淋巴細(xì)胞標(biāo)本1號(hào)染色體長(zhǎng)臂亞末端進(jìn)行PRINS檢測(cè)，同時(shí)通過熒光原位雜交(fluorescenceinsituhybridization，F(xiàn)ISH)技術(shù)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 結(jié)果：在間期核和中期分裂相中，PRINS技術(shù)均能特異性地檢測(cè)出21號(hào)染色體。在11例21-三體綜合征患兒標(biāo)本中，21號(hào)染色體標(biāo)記率平均為89％；在19例非21-三體綜合征患兒標(biāo)本中，21號(hào)染色體標(biāo)記率平均為93％