血清特異性microRNA作為塵肺早期診斷生物標(biāo)志物的研究.pdf

1、目的：
　　 目前，對(duì)塵肺的診斷主要采取職業(yè)史結(jié)合影像學(xué)的方式，一旦確診，病人肺纖維化進(jìn)程已無法逆轉(zhuǎn)。雖然塵肺病的防治主要在于控制工作環(huán)境的粉塵濃度，但是探索早期的診斷指標(biāo)，從“二級(jí)預(yù)防”出發(fā)，為預(yù)防塵肺提供科學(xué)依據(jù)。因此，尋找塵肺早期診斷的生物標(biāo)志物，對(duì)于早期發(fā)現(xiàn)疑似病人，早治療，降低塵肺和職業(yè)性腫瘤等重大職業(yè)病的發(fā)病率，具有重大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。本課題旨在篩選塵肺病人血清中特異表達(dá)的microRNA(miRNA)，探索血清m

2、iRNA作為塵肺早期生物標(biāo)志物的診斷價(jià)值。
　　 方法：
　　 采用TaqMan低密度芯片(TLDA)的方法，篩選出候選的可作為塵肺的篩查診斷及預(yù)后預(yù)測(cè)的血清miRNA標(biāo)志物，并采用RT-qPCR方法進(jìn)行驗(yàn)證。通過病例對(duì)照研究和統(tǒng)計(jì)分析，得到可用于塵肺篩查診斷的血清生物標(biāo)志物，并繪制受試者工作曲線評(píng)估候選的血清miRNA標(biāo)志物對(duì)塵肺的診斷價(jià)值，比較其靈敏度和特異性。最終擬合出多個(gè)候選miRNA用于塵肺早期篩查、早期診斷、

3、預(yù)后預(yù)測(cè)的聯(lián)合應(yīng)用模型。
　　 結(jié)果：
　　 1.通過TaqMan低密度芯片方法篩選出在正常對(duì)照組、塵肺組之間血清中有一定表達(dá)差異的10個(gè)候選miRNA，用RT-qPCR方法在Ⅰ期塵肺130例，Ⅱ期塵肺22例和對(duì)照152例血清樣本中進(jìn)行驗(yàn)證，均可檢測(cè)到有效表達(dá)。
　　 2.與健康對(duì)照組相比，塵肺樣本中6個(gè)miRNA呈高表達(dá)，分別為miR-21、miR-200c、miR-16、miR-206、miR-155、miR

4、-29a，1個(gè)呈低表達(dá)(miR-204)，差異均有顯著性。
　　 3.Ⅰ、Ⅱ期塵肺間的比較:結(jié)果顯示miR-204、miR-21在Ⅰ、Ⅱ期塵肺中的表達(dá)量存在差異性，miR-21在對(duì)照組以及Ⅰ、Ⅱ期塵肺中表達(dá)遞增，miR-204在對(duì)照組以及Ⅰ、Ⅱ期塵肺中表達(dá)遞減。
　　 4.擬合6個(gè)有塵肺篩查診斷價(jià)值且靈敏度和特異性良好的血清miRNA建立塵肺和正常人群中篩查診斷的Logistic回歸模型:logitP=13.769+0.

5、536×miR-21-0.878×miR-200C-0.012×miR-16-0.111×miR-206+0.117×.miR-155-1.192×miR-29a，其AUC-ROC為0.980(95％ CI:0.970-0.993,P＜0.0001)。
　　 結(jié)論：
　　 1.利用TaqMan低密度芯片繪制塵肺血清miRNA表達(dá)譜，方法可靠可行。
　　 2.血清miRNA可望作為塵肺篩查診斷的標(biāo)志物，具有潛在的應(yīng)