養(yǎng)殖刺參（Apostichopus japonicus）“腐皮綜合征”病原學及其感染源的研究.pdf

1、近年來，山東和遼寧兩省大力發(fā)展刺參養(yǎng)殖業(yè)，使其一躍成為中國北方沿海水產(chǎn)養(yǎng)殖的重要新興產(chǎn)業(yè)，取得了顯著的經(jīng)濟效益和社會效益。2004年，兩省的刺參養(yǎng)殖面積達到4萬hm<'2>以上，總產(chǎn)值超過100億元，成為當前中國海水養(yǎng)殖業(yè)中產(chǎn)值最大的養(yǎng)殖品種之一。然而，由于養(yǎng)殖的過速發(fā)展和不規(guī)范運作造成了病害問題日趨突出，出現(xiàn)了多種明顯病癥和大規(guī)模死亡現(xiàn)象，其中，越冬保苗期和養(yǎng)成期出現(xiàn)的“腐皮綜合征”是目前刺參養(yǎng)殖中危害最為嚴重的疾病。給廣大刺參養(yǎng)殖業(yè)

2、者造成了慘重的經(jīng)濟損失，也嚴重制約了該產(chǎn)業(yè)的持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展。為保證刺參養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展，積極開展“腐皮綜合征”流行病學及病原學研究是對疾病進行綜合防治必不可少的基礎性工作。 2003～2005年期間，對山東、遼寧兩省養(yǎng)殖刺參“腐皮綜合征”進行了全面、系統(tǒng)的流行病學調(diào)查。結果表明：“腐皮綜合征”是當前養(yǎng)殖刺參最常見、危害最為嚴重的疾病，該病發(fā)生率達80％，遍及各養(yǎng)殖區(qū)域；傳染性強，許多養(yǎng)殖單位的死亡率高達90％以上。越冬保苗期幼參和養(yǎng)

3、成期海參均可被感染發(fā)病，每年的12～3月份養(yǎng)殖水體溫度較低時(8℃以下)是發(fā)病高峰，溫度較高的夏秋季節(jié)也有發(fā)生。病參的主要癥狀從初期感染的口部腫脹、吐腸、收縮僵直，到后期感染的體表大面積潰瘍，最后導致海參死亡。病原排查發(fā)現(xiàn)該病主要是由細菌引起的，并對其發(fā)病特點和發(fā)病原因進行了探討。 本文首先對越冬保苗期刺參“腐皮綜合征”進行了初步的病原學分析，從其中三家育苗場患病個體病灶部位分離到了一種菌落形態(tài)一致的優(yōu)勢菌FP-1，從另外兩家育

4、苗場患病個體潰瘍部位分離得到另一種優(yōu)勢細菌FP-2，經(jīng)人工感染實驗證明對兩種優(yōu)勢菌FP-1和IFP-2都對健康幼參具有較強的致病性，且感染病參的癥狀與自然發(fā)病海參的癥狀相同，通過形態(tài)學、生理生化和16S rDNA分子生物學方法對該菌進行的分類鑒定表明，F(xiàn)P-1是一種假交替單胞菌(Pseudoalteromonasnigrifaciens)，F(xiàn)P-2是一種弧菌屬細菌(Vibrio sp．)。 對由假交替單胞菌(Pseudoalte

5、romonas nigrfaciens)導致“腐皮綜合征”的三家育苗場的整個養(yǎng)殖系統(tǒng)的水源、養(yǎng)殖池水、池底污物、餌料等進行的調(diào)查發(fā)現(xiàn)：水源中細菌含量不高，在0.8x10<'2>～1.2x10<'2>cells／mL之間，其特征與病灶處優(yōu)勢菌不同；而餌料中細菌含量最高可達3.2x10<'6> cells／mL，餌料、池水和池底污物的優(yōu)勢菌與病灶處優(yōu)勢菌基本一致，說明餌料可能是病原菌的主要來源。 對養(yǎng)成期刺參“腐皮綜合征”也進行了詳

6、細的病原學分析。2004年12月我們對冬季刺參養(yǎng)成期“腐皮綜合征”進行了詳細的病原學研究，從山東膠南、蓬萊的兩家養(yǎng)殖場的冬季養(yǎng)成期刺參病灶部位均分離到兩種優(yōu)勢細菌B1和B2，人工感染實驗發(fā)現(xiàn)該兩種菌都對健康刺參具有較強的致病性，感染病參的癥狀與自然發(fā)病海參的癥狀相同。采用常規(guī)生理生化方法和16 S rDNA分子生物學鑒定法對該菌進行了分類鑒定，鑒定結果表明Bl為燦爛弧菌(V．splendidus biovarⅡ)，B2為弧菌屬細菌(Vi

7、brio sp)。2005年9月對長島、龍口桑島以及膠南等地的夏季養(yǎng)成期刺參“腐皮綜合征”進行了病原學研究，從所有病參的病灶部位都分離到了一種優(yōu)勢度很高的致病菌A1，經(jīng)形態(tài)培養(yǎng)特性、生理生化實驗、人工感染試驗將該病原菌鑒定為嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophlia)。 為查找疾病的感染源，2005年1月我們對由弧菌導致“腐皮綜合征”發(fā)生的蓬萊這家養(yǎng)殖場養(yǎng)殖系統(tǒng)的水源(近岸海水)、養(yǎng)殖池水、底泥等進行的調(diào)查分析表明，

8、養(yǎng)殖場周圍近岸海水水質(zhì)一般，養(yǎng)殖池內(nèi)水質(zhì)較差，而且發(fā)病養(yǎng)殖池水和底泥中的細菌含量都非常高，經(jīng)生理生化比較發(fā)現(xiàn)，養(yǎng)殖池水和底泥中分離到的優(yōu)勢菌與刺參病灶處分離的優(yōu)勢菌基本一致，而水源中無優(yōu)勢菌，這說明底泥可能是該養(yǎng)殖場病原菌的來源。 研究結果表明，假交替單胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens)，燦爛弧菌(V.splendidus biovar Ⅱ)，嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophli