PI3K-AKT-GSK3β信號傳導通路在化療藥物誘導卵巢癌細胞凋亡中的實驗研究.pdf

1、華中科技大學博士學位論文PI3KAKTGSK3β信號傳導通路在化療藥物誘導卵巢癌細胞凋亡中的實驗研究姓名：宋曉紅申請學位級別：博士專業(yè)：婦產(chǎn)科學指導教師：馬丁20090501華中科技大學博士學位論文華中科技大學博士學位論文3可抑制紫杉醇導致的細胞核形態(tài)學變化；蛋白質印跡結果顯示，LiCl可抑制Caspase9和Caspase3的分子剪切，從而抑制凋亡的發(fā)生。3、3、線粒體跨膜電位指示劑JC1染色結果顯示，抑制劑LiCl可維持卵巢癌細胞O

2、V2008線粒體的極化狀態(tài)下紅綠熒光的強度，阻抑紫杉醇誘導的線粒體去極化所導致的紅色熒光減弱。4、細胞免疫熒光和線粒體提取試劑盒提取各組卵巢癌細胞線粒體后的蛋白質印跡結果顯示，抑制劑LiCl可抑制紫杉醇導致的Bax蛋白的線粒體轉位，并且抑制紫杉醇誘導的抗凋亡分子Bcl2、Bclxl和Mcl1的降解，上調其表達。5、流式細胞儀周期分析顯示，紫杉醇作用后可引起明顯的G2M期阻滯（69.33%），而LiCl預孵育的細胞G2M期阻滯明顯增加（8

3、8.13%），紫杉醇與PI3K抑制劑LY294002（20μM）合用后則可明顯降低其G2M期阻滯（44.06%）。6、蛋白質印跡結果顯示，應用RNA干擾降低AKT2表達或應用LY294002降低AKT活性均可增強紫杉醇誘導的卵巢癌細胞凋亡。結論結論1、GSK3β高水平磷酸化可抑制紫杉醇誘導的卵巢癌細胞凋亡。2、磷酸化GSK3β可抑制紫杉醇誘導的Bax蛋白的線粒體轉位和抗凋亡分子Bcl2、Bclxl和Mcl1的降解，從而維持線粒體的穩(wěn)定，

4、抑制凋亡。3、GSK3β可通過調節(jié)CyclinB1和CDC2影響紫杉醇誘導的G2M期阻滯。第二部分PI3KAKTGSK3β信號通路在順鉑誘導卵巢癌細胞凋亡中作用的研究第二部分PI3KAKTGSK3β信號通路在順鉑誘導卵巢癌細胞凋亡中作用的研究目的目的探討增加GSK3β的磷酸化狀態(tài)在順鉑誘導的卵巢癌細胞凋亡中的作用。方法方法運用GSK3β特異性抑制劑LiCl增加GSK3β磷酸化水平，應用流式細胞儀檢測濃度梯度增加的順鉑誘導的兩株卵巢癌細胞