腫瘤細(xì)胞粘附誘導(dǎo)小鼠肺血管內(nèi)皮釋放一氧化氮.pdf

1、研究目的:惡性腫瘤血行轉(zhuǎn)移是影響腫瘤患者生存的主要因素,了解腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制,預(yù)防和治療腫瘤轉(zhuǎn)移對(duì)提高治療效果具有重要作用.血行轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤轉(zhuǎn)移的重要途徑之一.大量的實(shí)驗(yàn)和臨床資料表明進(jìn)入血流的腫瘤轉(zhuǎn)移的重要途徑之一.大量的實(shí)驗(yàn)和臨床資料表明進(jìn)入血流的腫瘤細(xì)胞絕大部分將會(huì)死亡,只有極少數(shù)腫瘤細(xì)胞能存活并形成轉(zhuǎn)移灶.這種導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡機(jī)制目前尚不完全清楚,可能和內(nèi)生性一氧化氮誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡有關(guān).由于方法學(xué)等的限制這種內(nèi)生性一氧化氮的組

2、織來源尚未明確.該研究目的是探討腫瘤細(xì)胞進(jìn)入肺循環(huán)后血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)生性一氧化氮能力.材料與方法:使用C57BL/6小鼠及同系鼠的Endothelial Nitric-Oxide synthase(eNOS)基因缺損小鼠(knock-out mice).在無(wú)菌條件下切開胸腹,完整切除心肺,肺、動(dòng)靜脈、氣管插管建立體外肺循環(huán)及換氣的活體臟器摘除肺標(biāo)本.將一氧化氮探針DAF—2DA放入肺循環(huán)液體中,標(biāo)記到肺毛細(xì)血管內(nèi)皮上.再將小鼠由來高度

3、轉(zhuǎn)移性惡性黑色素瘤細(xì)胞系B16F1、人來尖折高度轉(zhuǎn)移性惡性黑色素瘤細(xì)胞系WM1205、及無(wú)轉(zhuǎn)移性黑色素瘤細(xì)胞系WM1789標(biāo)記上MitoTraker熒光并分別經(jīng)肺動(dòng)脈緩慢注入腫瘤細(xì)胞懸浮液0.5ml(0.5×10<'6>個(gè)腫瘤細(xì)胞).使用高分辨率熒光顯微鏡—電子計(jì)算機(jī)系統(tǒng)觀察毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)一氧化氮濃度的變化,分別記錄注入腫瘤細(xì)胞后5分鐘、10分鐘、15分鐘時(shí)的NO的熒光強(qiáng)度.結(jié)論:經(jīng)肺動(dòng)脈進(jìn)入小鼠肺循環(huán)的鼠和人黑色素瘤細(xì)胞均有誘導(dǎo)肺