晶狀體損傷促進視神經(jīng)損傷后軸突再生機制的研究.pdf

1、視神經(jīng)損傷(optic nerve injury)是眼科常見的一種臨床眼外傷類型及致盲原因,常見于各種面部、顱腦及眼眶外傷,如壓迫、牽拉、切斷等原因均能導致視神經(jīng)嚴重受損,可能造成患者視功能不可逆性的喪失。視神經(jīng)損傷后大量視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(retinal ganglion cells,RGCs)的壞死或凋亡,是視力喪失的主要原因。減緩或抑制RGCs的死亡及促進其軸突的再生,是有效治療視神經(jīng)損傷和促進視功能恢復的基礎。因此視神經(jīng)損傷再生已

2、成為當前國內(nèi)外研究的熱點。
　　 傳統(tǒng)認為成年哺乳動物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷后不能再生,損傷后的神經(jīng)元難以形成新的突觸連接。20世紀80年代,Hall等人用一段自體坐骨神經(jīng)移植到視神經(jīng)損傷區(qū),并成功地誘導激發(fā)了視神經(jīng)損傷后軸突的再生,中樞神經(jīng)損傷后不能再生的觀念發(fā)生了改變。近年來Leon和Fischer等研究發(fā)現(xiàn),單純晶狀體損傷能大大增加RGCs的存活率,并能促進視神經(jīng)損傷后的軸突再生。因而晶狀體損傷促進視神經(jīng)損傷再生的機制研究,受

3、到國內(nèi)外學者的廣泛關注。研究認為激活的巨噬細胞在外周神經(jīng)損傷后,具有吞噬、合成和分泌多種活性因子等作用,形成有利于神經(jīng)再生的內(nèi)環(huán)境,從而促進外周神經(jīng)的再生,但巨噬細胞在中樞神經(jīng)損傷再生中是否也有這種作用,晶狀體損傷能否激活巨噬細胞在視神經(jīng)損傷再生中發(fā)揮作用研究很少。本實驗采用大鼠在體實驗研究的方法進行進一步探討和研究。
　　 目的：研究晶狀體損傷促進視神經(jīng)損傷后視網(wǎng)膜節(jié)細胞軸突再生的作用,并探討活化的巨噬細胞所起作用,為視神經(jīng)損

4、傷后治療方面提供新的思路。
　　 方法：選用普通級成年健康Wistar大鼠50只作為實驗動物,隨機分為4組:正常對照組5只不做任何處理；單純視神經(jīng)橫斷傷(NC)組15只；聯(lián)合晶狀體損傷(NC+LP)組15只；聯(lián)合玻璃體腔注射酵母多糖(NC+ZI)組15只。分別在術后1周、2周、3周后處死大鼠5只,通過免疫組化方法應用ED—1單克隆抗體,標記視網(wǎng)膜內(nèi)激活的巨噬細胞,及免疫熒光方法標記視網(wǎng)膜生長相關蛋白-43(growth asso

5、ciated protein43,GAP-43)的表達,觀察并記錄不同時間點陽性熒光著色面積。
　　 結(jié)果：正常對照組及NC組,在視網(wǎng)膜的各層中未見ED-1陽性的巨噬細胞,NC+LP組及NC+ZI組,在視網(wǎng)膜的各層中可見ED-1陽性巨噬細胞。
　　 視網(wǎng)膜中GAP-43表達:正常對照組僅見少量GAP-43熒光素著色,主要集中在內(nèi)叢狀層,視網(wǎng)膜節(jié)細胞層未見著色。NC組術后1周時視網(wǎng)膜節(jié)細胞層可見少量GAP-43熒光素染色,

6、隨時間延長逐漸減少,在2周時基本消失。NC+LP組及NC+ZI組術后視網(wǎng)膜節(jié)細胞層可見大量GAP-43熒光素著色,術后前2周GAP-43著色面積較明顯,至3周時仍有著色。
　　 NC組與正常組視網(wǎng)膜GAP-43陽性細胞著色面積相比,在1周時有顯著統(tǒng)計學差異(P<0.01)；在2、3周時無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
　　 NC組分別與NC+LP組及NC+ZI組在不同時間點視網(wǎng)膜GAP-43陽性著色面積均有顯著統(tǒng)計學差異(

7、P<0.01)；均在傷后早期GAP-43表達最多,以后其表達量逐漸下降。
　　 NC+LP組與正常組相比,視網(wǎng)膜GAP-43陽性細胞著色面積均有顯著統(tǒng)計學差異(P<0.01)；與NC+ZI組相比,1周時無統(tǒng)計學差異(P>0.05),2、3周時均有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。
　　 NC+ZI組與正常組視網(wǎng)膜GAP-43陽性細胞著色面積不同時間點均有顯著統(tǒng)計學差異(P<0.01)；
　　 NC+LP組(及NC+ZI