二烯丙基二硫誘導(dǎo)鼻咽癌CNE2細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制.pdf

1、目的：采用基因芯片方法分析二烯丙基二硫（diallyl disulfide, DADS）誘導(dǎo)鼻咽癌CNE2細(xì)胞凋亡相關(guān)基因，初步探討DADS誘導(dǎo)CNE2細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制。
　　方法：采用MTT法檢測DADS抑制CNE2細(xì)胞增殖的IC50值；細(xì)胞生長曲線分析DADS對CNE2細(xì)胞生長的抑制作用；Hoechst染色法、流式細(xì)胞術(shù)及DNA凝膠電泳法，檢測DADS誘導(dǎo)CNE2細(xì)胞凋亡的情況；采用基因芯片，檢測DADS誘導(dǎo)CNE2細(xì)胞凋亡

2、相關(guān)基因；RT-PCR和Western blot驗(yàn)證基因和蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1、DADS抑制CNE2細(xì)胞增殖的IC50值為30mg·L-1；隨著DADS濃度增加，處理時(shí)間延長，CNE2細(xì)胞抑制明顯增加（P<0.05）。
　　2、Hoechst染色結(jié)果顯示，用30mg·L-1 DADS可誘導(dǎo)CNE2細(xì)胞中出現(xiàn)典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變。
　　3、流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示，隨著DADS濃度的升高，CNE2細(xì)胞的凋

3、亡率逐漸增加（P<0.05）。
　　4、瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示，隨著DADS濃度升高達(dá)到30mg·L-1時(shí)，可見DNA梯形條帶。
　　5、基因芯片共檢測出1074個(gè)差異表達(dá)基因，其中與細(xì)胞凋亡相關(guān)基因24個(gè)（上調(diào)基因19個(gè)，下調(diào)基因5個(gè)）。
　　6、RT-PCR和Western-blot結(jié)果證實(shí)上調(diào)基因SON和下調(diào)基因IL24與基因芯片檢測結(jié)果基本一致。
　　結(jié)論：
　　1、DADS可誘導(dǎo)CNE2細(xì)胞凋亡。