超聲定位輻照載藥微泡對(duì)卵巢癌SKOV3裸鼠皮下移植瘤生物學(xué)效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察低頻超聲定位輻照載紫杉醇脂質(zhì)微泡(paclitaxel-carrying liposome microbubbles，PLM)對(duì)卵巢癌SKOV3裸鼠皮下移植瘤的抑制作用，并通過(guò)觀察其抑瘤率及腫瘤組織中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、微血管密度(MVD)和細(xì)胞核相關(guān)抗原(Ki-67)的變化，探討超聲聯(lián)合PLM對(duì)SKOV3皮下移植瘤的生物學(xué)效應(yīng)及可能的機(jī)制。為探索一種全新的靶向治療卵巢惡性腫瘤的手段提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法

2、： 1.實(shí)驗(yàn)分組：建立卵巢癌SKOV3裸鼠皮下移植瘤模型，并將成功建立模型的20只裸鼠隨機(jī)分成4組，即實(shí)驗(yàn)Ⅰ組為PLM輻照組，實(shí)驗(yàn)Ⅱ組為紫杉醇藥物治療組，實(shí)驗(yàn)Ⅲ組為單純PLM組和生理鹽水對(duì)照組。每組5只分別給予不同的處理方法。 2.處理方法：實(shí)驗(yàn)Ⅰ組：將PLM用生理鹽水稀釋，按紫杉醇5mg/kg的劑量每只裸鼠經(jīng)尾靜脈注入PLM 0.2ml(實(shí)際載藥量約0.1mg)后，予超聲探頭輻照瘤組織區(qū)(輸出功率0.5W/cm2，作用

3、時(shí)間3min)；實(shí)驗(yàn)Ⅱ組：將紫杉醇注射液稀釋為0.5mg/ml，按紫杉醇5mg/kg的劑量于裸鼠尾靜脈注入0.2ml(藥量0.1mg)；實(shí)驗(yàn)Ⅲ組為：同實(shí)驗(yàn)Ⅰ組方法稀釋PLM，每只裸鼠經(jīng)尾靜脈注入PLM 0.2ml后，不予超聲輻照；對(duì)照組則以生理鹽水0.2ml注入每只裸鼠。各組上述處理每天1次，連續(xù)7天。 3.觀察指標(biāo)：末次治療后24h頸椎脫位處死裸鼠并計(jì)算抑瘤率(重量抑瘤率WIR和體積抑瘤率VIR)；透射電鏡下觀察腫瘤細(xì)胞超微結(jié)

4、構(gòu)的改變；用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)腫瘤組織中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、微血管密度(MVD)和細(xì)胞核相關(guān)抗原(Ki-67)的表達(dá)，并采用北航CM2000B多功能真彩色病理圖像分析系統(tǒng)對(duì)bFGF及Ki-67進(jìn)行半定量分析，以面密度反映其陽(yáng)性表達(dá)的陽(yáng)性率(面密度=陽(yáng)性目標(biāo)面積/統(tǒng)計(jì)場(chǎng)面積)。 結(jié)果： 1.抑瘤率：對(duì)照組WIR為0，VIR為0；實(shí)驗(yàn)Ⅰ組WIR為55.41％，VIR為52.77％；實(shí)驗(yàn)Ⅱ組WIR為36.4

5、8％，VIR為28.06％；實(shí)驗(yàn)Ⅲ組WIR為5.45％，VIR為7.07％。 2.bFGF表達(dá)的陽(yáng)性率：對(duì)照組為0.29248±0.01062；實(shí)驗(yàn)Ⅰ組為0.19049±0.01099；實(shí)驗(yàn)Ⅱ組為0.23304±0.01819；實(shí)驗(yàn)Ⅲ組為0.27422±0.01342。 3.MVD值：對(duì)照組為27.044±1.732；實(shí)驗(yàn)Ⅰ組為15.124±1.353；實(shí)驗(yàn)Ⅱ組為19.226±1.501；實(shí)驗(yàn)Ⅲ組為25.228±1.15

6、1。 4.Ki-67表達(dá)的陽(yáng)性率：對(duì)照組為0.30062±0.02032；實(shí)驗(yàn)Ⅰ組為0.15699±0.01317；實(shí)驗(yàn)Ⅱ組為0.23271±0.01424；實(shí)驗(yàn)Ⅲ組為0.28456±0.01588。 5.與對(duì)照組比較，實(shí)驗(yàn)Ⅰ組及實(shí)驗(yàn)Ⅱ組對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)都有明顯的抑制作用WIR分別為55.41％和36.48％，VIR分別為52.77％和28.06％)(P＜0.01)，而實(shí)驗(yàn)Ⅰ組的抑瘤率最高(P＜0.01)；實(shí)驗(yàn)Ⅰ組及實(shí)驗(yàn)Ⅱ組

7、腫瘤組織中bFGF、MVD及Ki-67的陽(yáng)性表達(dá)量均下降(P＜0.01)，以實(shí)驗(yàn)Ⅰ組下降最明顯(P＜0.01)。實(shí)驗(yàn)Ⅲ組與對(duì)照組在抑瘤率、bFGF、MVD及Ki-67的陽(yáng)性表達(dá)量上無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 結(jié)論：與單純紫杉醇藥物組相比，超聲定位輻照PLM的方法對(duì)裸鼠SKOV3卵巢癌皮下移植瘤具有較強(qiáng)的體內(nèi)抑瘤效應(yīng)，可通過(guò)抑制腫瘤血管生成因子bFGF的合成，從而阻止腫瘤組織內(nèi)微血管的形成，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡，直接或間接抑制腫