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文檔簡介
1、目的: 通過檢測急性白血病患者和對照組兒童中CYP3A5-6986位點的基因型分布特點,探討CYP3A5基因多態(tài)性與兒童急性白血病易感的相關性;檢測急性白血病患者的CYP3A5mRNA表達水平,探討基因表達水平對白血病患者治療、預后評價的指導意義。 方法: 1、采用病例-對照研究,應用聚合酶鏈-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)方法及PCR產物序列測定,檢測兒童急性白血病患者139例,其中包括急性淋巴細胞性
2、白血病(ALL)91例,急性髓細胞性白血病(AML)48例,和120例對照組兒童的CYP3A5-6986位點基因型分布及等位基因頻率。 2、用實時定量RT-PCR法檢測34例初診的ALL、32例AML患兒及20例對照組兒童的骨髓單個核細胞內wt-CYP3A5和SV1-CYP3A5mRNA的表達水平及對部分病例進行跟蹤隨訪。同時結合患兒的性別、FAB分型、染色體數量核型各項指標綜和分析。 結果: 1、對照組和急性白
3、血病兒童中CYP3A5-6986多態(tài)性位點存在野生型(CYP3A5<'*>1/<'*>1)、雜合突變型(cYP3A5<'*>1/<'*>3)、純合突變型(CYP3A5<'*>3/<'*>3)三種基因型:對照組與ALL組、AML組的基因型及等位基因頻率分布存在顯著性差異。 2、①66例初診AL患者中CYP3A5<'*>1/<'*>1基因型15例,<'*>1/<'*>3基因型16例,<'*>3/<'*>3基因型35例。三種基因型內均
4、能檢測到野生型mRNA(wt-mRNA),變異型mRNA(SV1-mRNA)存在于<'*>1/<'*>3和<'*>3/<'*>3基因型中。無論是CYP3A5<'*>1/<'*>3還是CYP3A5<'*>3/<'*>3基因型,wt-mRNA和SV1-mRNA均明顯相關,r分別為0.790和0.847。②66例初診AL患兒按基因型分組后對他們的mRNA表達水平進行檢測,三組的wt-mRNA檢測結果分別為27.78±13.25、8.4±3.2
5、3、0.8±1.73,存在顯著性差異(P均 6、A表達水平高低沒有影響。但伴有t(1:19)、t(9;22)或t(4;11)異常核型的初診ALL患者wt-CYP3A5m RNA與高于正常核型的ALL患者。⑤對兩例ALL患兒在不同時期(包括初診、緩解期、復發(fā)前)進行CYP3A5表達水平的跟蹤檢測,復發(fā)前wt-CYP3A5的表達水平較前升高。 結論: 1、CYP3A5 6986G多態(tài)性與兒童急性白血病的易感性可能相關。 2、實時定量PCR的方法證實了CYP3A5在
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