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文檔簡介
1、目的:觀察小劑量地塞米松對生長期小鼠骨代謝的影響。
方法:24只4周齡的雌性C57B1/6J小鼠隨機(jī)分兩組,每組各12只:地塞米松組(DEX組),右側(cè)股四頭肌肌注1mg/kg體重地塞米松;對照組。每周稱量小鼠體重并記錄。所有小鼠干預(yù)4周后予以腹腔注射巴比妥麻醉,頸椎脫臼法處死小鼠后立即摘眼球取血,分離血清,酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)檢測Ⅰ型前膠原N端前肽(P
2、INP)和骨Ⅰ型膠原交聯(lián)C端頂端肽(CTX-Ⅰ)蛋白的表達(dá)水平;取一側(cè)脛骨行顯微CT掃描分析,掃描完成后進(jìn)行三維重建,用顯微CT自帶的MicroView2.0+ABA軟件對松質(zhì)骨表觀骨密度、組織骨密度、骨體積分?jǐn)?shù)、骨面積分?jǐn)?shù)、骨小梁厚度、骨小梁間隔、骨小梁數(shù)量、結(jié)構(gòu)模型指數(shù)等指標(biāo)進(jìn)行分析。并建立各組松質(zhì)骨二維圖像;免疫組化(immunohistochemistry IHC)方法檢測脛骨干骺端骨保護(hù)素(osteoprotegerin OP
3、G)、核因子-κB受體活化因子配體(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)蛋白表達(dá);抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acidphosphatase TRAP)染色方法檢測破骨細(xì)胞。
結(jié)果:與對照組相比,DEX組小鼠脛骨干骺端表觀骨密度及骨體積分?jǐn)?shù)明顯增高(p<0.05),而血清PINP及β-CTX水平明顯下降(p<0.05)。地塞米
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