2型糖尿病大鼠血管反應(yīng)性與血管平滑肌上Bkca的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:本研究根據(jù)目前國內(nèi)外相關(guān)研究情況,特別針對(duì)目前T2DM大鼠血管反應(yīng)性與鉀通道相關(guān)的研究資料潰乏的現(xiàn)狀,采用小劑量STZ+高脂飲食復(fù)制與臨床表現(xiàn)有較好相似性的T2DM大鼠模型,運(yùn)用血管環(huán)測(cè)定技術(shù),以胸主動(dòng)脈、腸系膜小血管為研究對(duì)象,系統(tǒng)進(jìn)行T2DM大、小血管反應(yīng)性與BKca通道活性變化的相關(guān)性研究,力圖從整體、器官水平揭示T2DM血管反應(yīng)性與平滑肌上BKca通道變化的內(nèi)在聯(lián)系,為進(jìn)一步從細(xì)胞、分子水平揭示T2DM血管平滑肌上BKca

2、電生理變化通道基因及通道表達(dá)變化、及其調(diào)節(jié)機(jī)制研究奠定基礎(chǔ)。
　　 方法:(1)2型糖尿病大鼠模型的建立:SD大鼠高脂高糖飲食一個(gè)月,然后給予亞治病劑量鏈脲佐菌素STZ(25mg／kg,以PH4.2的0.1mol／L的枸櫞酸緩沖液配成0.25％的濃度)腹腔注射一次。一周后空腹采尾靜脈血測(cè)血糖,篩選出空腹血糖≥7.0mmol／L且伴有胰島素敏感性降低者確立為成功的2型糖尿病大鼠模型。(2)于溶液1中迅速分離出胸主動(dòng)脈、腸系膜動(dòng)脈血

3、管,將游離血管剪成長(zhǎng)約2～3mm的血管環(huán),用兩根銀絲穿過動(dòng)脈環(huán)并形成三角環(huán)狀,固定在含95％O2和5％CO2,37℃的浴槽中。血管環(huán)經(jīng)過張力換能器、生物放大器與生理記錄儀相連,采用Chart軟件采集數(shù)據(jù)并進(jìn)行分析。觀察IbTX前后血管環(huán)對(duì)SNP舒張反應(yīng)的變化。KCl檢驗(yàn)血管環(huán)活性.PE引起預(yù)收縮。
　　 結(jié)果:(1)T2DM模型建立成功指標(biāo):①T2DM(n=10)大鼠體重從第八周起到十二周分別為238±27g、244±27g、2

4、28±30g較正常對(duì)照組(n=10)316±22g、326±23g、334±28g明顯降低,兩組間有明顯差異(P<0.01)；②取標(biāo)本時(shí),測(cè)得模型組大鼠(n=10)血糖、收縮壓與舒張壓分別為16.95±2.57mmol／L、145±28 mmHg、118±24mmHg,與正常對(duì)照組大鼠(n=10)6.7±053 mmHg、102±9 mmHg、80±9mmHg比較明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；③T2DM(n=8)大鼠血胰島

5、素、胰島素敏感指數(shù)、血脂(LDL-C、TG、TC)指標(biāo)115.53±75.18μIU／ml、0.0006±0.0003、1.16±0.12 mmol／L、1.97±0.13mmol／L、4.22±0.23 mmol／L,與正常對(duì)照組(n=8)16.23±6.03μU／ml、1.01±0.11 mmol／L、0.82±0.09 mmol／L、2.53±0.15 mmol／L比較明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。(2)腸系膜動(dòng)脈血

6、管環(huán)加入IbTX后SNP引起的舒張反應(yīng)的變化:①T2DM(n=8ring)大鼠腸系膜動(dòng)脈血管環(huán)在加入IbTX后的累計(jì)舒張百分率(10-7,10-610-5μmmol／L SNP)分別為:29±6、40±8、52±6與在加入IBTX前57±9、79±7、84±6降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；②對(duì)照組(n=8ring)大鼠腸系膜動(dòng)脈血管環(huán)的累計(jì)舒張百分率(10-4,10-6,10-5μmmol／L SNP)在加入IbTX后分別為:

7、35±9、63±5、75±12與加入IbTX前46±14、71±9、81±12也降低,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(3)胸主動(dòng)脈血管環(huán)加入IbTX后SNP引起的舒張反應(yīng)的變化:①T2DM組(n=8ring)大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)的累計(jì)舒張百分率在加入IbTX后4±3、18±6、17±5與加入IbTX前9±4、26±5、29±6降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);②正常組(n=8ring)大鼠胸主動(dòng)脈血管環(huán)的累計(jì)舒張百分率在加入I

8、bTX后6±2、37±5、40±6與加入IbTX前11±7、44±9、51±14也降低,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 結(jié)論:1模型復(fù)制是成功的,具有高血糖、高血壓、高血脂、胰島素抵抗的特點(diǎn)。2模型組大鼠血管環(huán)對(duì)KCl的反應(yīng)性與正常組比較無顯著差異；對(duì)PE的收縮反應(yīng)性增強(qiáng),與正常組比較差異顯著。3模型組大鼠血管平滑肌在加入IbTX后舒張百分率下降,而正常對(duì)照組在加入IbTX前后舒張百分率無明顯變化。提示模型組大鼠血管