SLC21A6基因多態(tài)性對(duì)辛伐他汀、阿伐他汀降脂療效的影響.pdf

1、[目的與背景] 藥物基因組學(xué)(Pharmacogenomics)研究不同個(gè)體的藥物反應(yīng)差異與DNA多態(tài)性的關(guān)系，即通過DNA序列差異性分析，在基因組水平上認(rèn)識(shí)疾病及藥物作用的個(gè)體差異的機(jī)理，指導(dǎo)臨床給藥個(gè)體化。SLC21A6因編碼產(chǎn)物有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)多肽181(OATP1B1，LST-1，OATP-C和OATP2)是肝臟細(xì)胞膜特異性表達(dá)的主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)體，目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)SLC21A6基因的多個(gè)單核苷酸多態(tài)性(SNPs)，且一些變異與OAT

2、P1B1的轉(zhuǎn)運(yùn)活性改變相關(guān)。辛伐他汀的活性代謝產(chǎn)物辛伐他汀酸以及阿伐他汀和其活性代謝產(chǎn)物皆是OATP1B1轉(zhuǎn)運(yùn)底物。有理由推測(cè)：SLC21A6基因多態(tài)性引起OATP1B1轉(zhuǎn)運(yùn)活性的改變，影響辛伐他汀、阿伐他汀在人體內(nèi)的處置，進(jìn)而影響它們的降脂效果。國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道的SLC21A6 388A>G和512T>C在高加索人群的變異頻率分別是46．6﹪和20．2﹪，而在中國(guó)人群的變異頻率尚未見報(bào)道；SLC21A6基因多態(tài)性對(duì)辛伐他汀、阿伐他汀降脂療

3、效的影響仍不清楚。因此，本課題旨在查明SLC21A6 388A>G和512T>C基因多態(tài)性在中國(guó)高血脂人群的分布；闡明SLC21A6因多態(tài)性對(duì)辛伐他汀、阿伐他汀降脂療效的影響，探討SLC21A6因多態(tài)性與辛伐他汀、阿伐他汀降脂療效的相關(guān)性，為根據(jù)患者基因型制定個(gè)體化給藥方案提供信息。 [材料與方法] 1．研究對(duì)象2005年11月～2006年8在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院和平頂山第一人民醫(yī)院收集高脂血癥患者400例。高脂血癥診

4、斷標(biāo)準(zhǔn)是空腹血清檢查總膽固醇(TC)>6.0mmol/L，或低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)>3.36mmol/L或甘油三酯(TG)>1.78mmol/L或高密度脂蛋白(HDL-C)<0.82mmol/L。辛伐他汀治療組200例(每晚頓服20mg)，阿伐他汀治療組200例(每晚頓服20mg)。分別在給藥前，給藥15天和30天后采集患者空腹靜脈血，測(cè)定血清甘油三酯(TG)，總膽固醇(TC)，低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，高密度脂蛋白膽

5、固醇(HDL-C)水平。患者了解試驗(yàn)過程并均簽署知情同意書，研究方案經(jīng)鄭州大學(xué)倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)。 2．基因型檢測(cè)采用酚氯仿法提取DNA，用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片斷長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLR)技術(shù)檢測(cè)SLC21A6 388A>G多態(tài)性，用等位基因特異性-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(AS-PCR)技術(shù)檢測(cè)SLC2lA6 521T>C多態(tài)性，通過PCR擴(kuò)增產(chǎn)物直接測(cè)序驗(yàn)證基因型檢測(cè)方法的可靠性。 3．統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSSl2.0統(tǒng)計(jì)軟

6、件包分析。以x<'2>檢驗(yàn)檢測(cè)等位基因和基因型分布是否符合．Hardy-Weinberg平衡；用x<'2>檢驗(yàn)或Fisher’s精確概率檢驗(yàn)檢測(cè)不同種族間基因多態(tài)性分布的差異；用重復(fù)測(cè)量方差分析(repeatedmeasure ANOVA)檢測(cè)不同基因型組間血脂變化百分率的差異；檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。 [結(jié)果] 1．SLC21A6基因多態(tài)性分布SLC2/A6388A>G和512T>C等位基因在中國(guó)高血脂人群的變異頻率分

7、別是72.1﹪和16.2﹪。等位基因和基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡。SLC21A6388A>G在中國(guó)高血脂人群的變異頻率與非裔美國(guó)正常人群一致(P=0.727)，明顯高于日本、歐裔美國(guó)和芬蘭高加索正常人群的變異頻率(P=0.007，P=0.000，P=0.000)。SLC21A6 512T>C在中國(guó)高血脂人群的變異頻率與日本、歐裔美國(guó)正常人群一致(P=-0.884，P=-0.621)，但明顯高于非裔美國(guó)正常人群的變異頻

8、率(P=0.000)，明顯低于芬蘭高加索正常人群的變異頻率(P=0.036)。 2．辛伐他汀、阿伐他汀的降脂療效患者每天頓服20mg辛伐他汀或阿伐他汀，在給藥15和30天后FG、TC、LDL-C水平均有顯著降低，HDL-C水平在給藥15天后反而明顯下降，30天后才出現(xiàn)升高趨勢(shì)。 3.SLC21A6 388A>G和521T>C基因多態(tài)性對(duì)辛伐他汀、阿伐他汀降脂療效的影響在辛伐他汀治療組，TT、 TC和CC基因型亞組患者給

9、藥15天和30天后LDL-C降低幅度有顯著差異(repeated measurement ANOVA，P=0.047)，其中30天后TC基因型亞組患者的LDL-C降低幅度顯著高于刀基因型患者(29.1±5.6﹪vs 27.1±5.4﹪，P=0.029)，CC基因型患者的LDL-C降低幅度高于TC基因型患者但無(wú)顯著性差異(30.8±5.4﹪vs 29.1±5.6﹪，P=0.593)；未發(fā)現(xiàn)TT、TC和CC基因型亞組患者的TG、TC和HDL

10、-C水平變化百分率有顯著差異。在阿伐他汀治療組，TT、TC和CC基因型亞組患者的TG、TC、LDL-C和HDL-C水平變化百分率均無(wú)顯著差異。SLC21A6 388A>G和521T>C構(gòu)成單倍體時(shí)，在辛伐他汀和阿伐他汀治療組，AATT、Ht(Heterozygote)和GGCC基因型亞組患者TG、TC、LDL-C和HDL-C水平變化百分率均無(wú)顯著差異。 [結(jié)論] 1.SLC21A6 388A>G和512T>C等位基因在